IL-19基因單核苷酸多態(tài)性及血清水平與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種自身免疫性結(jié)締組織病,涉及多系統(tǒng)、多器官,其臨床表現(xiàn)復(fù)雜,該病以免疫系統(tǒng)異常,多種自身抗體產(chǎn)生、補體活化,免疫復(fù)合物沉積為主要特征。SLE好發(fā)于女性,男女發(fā)病率性別比為1∶7～1∶10。SLE的具體發(fā)病機制至今尚不能完全闡明,目前認(rèn)為遺傳因素與環(huán)境因素的相互影響和相互作用在SLE疾病的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。
　　細(xì)胞因子是由白細(xì)胞

2、分泌的一類小分子、水溶性的的糖蛋白。作為細(xì)胞間信號傳遞分子,細(xì)胞因子參與機體的固有免疫和適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)。IL-19是新發(fā)現(xiàn)的一種促炎性細(xì)胞因子,是IL-10細(xì)胞因子家族的一員,該家族細(xì)胞因子還有IL-10,IL-20,IL-22,IL-24,IL-26,IFN-λ1,IFN-λ2和IFN-λ3。IL-19表達(dá)受其基因控制,研究發(fā)現(xiàn)其基因3’UTR rs2243188所處的區(qū)域包含有對很多基因正常表達(dá)所必需的調(diào)控元件。已有數(shù)項研究證實,I

3、L-19基因 rs2243188位點與白癜風(fēng)、銀屑病和潰瘍性結(jié)腸炎等自身免疫病遺傳易感性有關(guān)聯(lián)。但是,IL-19基因rs2243188位點多態(tài)性與中國漢族人群SLE遺傳易感性是否存在相關(guān)性還未見報道。
　　本研究基于病例對照研究的設(shè)計思路,采用TaqMan基因分型技術(shù)和ELISA技術(shù)分別檢測SLE患者及健康對照IL-19基因多態(tài)性和血清水平,以探索IL-19與SLE之間的關(guān)系。
　　研究一:IL-19基因多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼

4、瘡的相關(guān)性研究
　　目的:比較SLE患者和正常對照者IL-19基因rs2243188位點的等位基因和基因型頻率的差異,分析IL-19基因rs2243188位點多態(tài)性與SLE疾病遺傳易感性的關(guān)系,分析IL-19基因rs2243188位點多態(tài)性與臨床特征之間的關(guān)系。
　　方法:本研究納入的545例病例均來自安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院(第一附屬醫(yī)院和附屬省立醫(yī)院)風(fēng)濕免疫科的SLE患者。正常對照來自安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院健康體檢中心健

5、康體檢者,共收集613例。兩組在性別和年齡方面均匹配。在獲得知情同意后,采集病例和對照組全部研究對象的外周靜脈血。SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會修訂的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)。運用TaqMan基因分型技術(shù)檢測SLE病例組和正常對照組IL-19基因rs2243188位點的等位基因和基因型頻率。
　　χ2檢驗或確切概率法來分析兩組間等位基因頻率和基因型頻率的分布差異,統(tǒng)計軟件使用的是SPSS10.01。檢驗水準(zhǔn)為α=0.05。

6、
　　結(jié)果:(1)基因分型結(jié)果在病例組和正常對照組中均滿足哈迪-溫伯格平衡(病例組:χ2=0.01,P=0.935;對照組:χ2=1.19,P=0.276)。
　　(2)IL-19基因rs2243188位點多態(tài)性與SLE SLE患者組和正常對照組中均檢出CC、AA和CA三種基因型。SLE患者組CC、AA和CA的基因型頻率分別為9.6％、47.5%和42.9%,而對照組則為11.6%、40.6%和47.8%;SLE患者組C和A

7、等位基因頻率為31.0%和69.0%,對照組則為35.5%和64.5%。SLE患者組與對照組相比,rs2243188位點C等位基因的頻率分布差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(C versus A: OR:0.817,95% CI:0.687-0.972,P=0.023),顯性模型基因型（CC+CA versus AA)的頻率分布也具有統(tǒng)計學(xué)差異（OR:0.755,95% CI:0.598-0.953,P=0.018)。
　　(3)IL-19基因

8、rs2243188位點多態(tài)性與狼瘡腎炎(LN)易感性狼瘡腎炎患者組等位基因和基因型分布:C、A等位基因頻率分別為34.8%和65.2%;CC、AA、CA基因型的頻率分別為14.6%、45.0%和40.4%。非LN患者組:C、A等位基因頻率為29.3%和70.4%;CC、AA、CA基因型的頻率分別為7.2%、48.7%和41%。統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)隱性模型基因型(CC versus AA+CA)的頻率分布差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(OR:2.201,95

9、%CI:1.235-3.920,P=0.006)。最小等位基因C的和顯性模型基因型的頻率分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(4)IL-19基因rs2243188多態(tài)性與SLE主要臨床特征通過分析IL-19基因rs2243188多態(tài)性與SLE臨床特征的關(guān)系可以發(fā)現(xiàn)與SLE臨床特征有關(guān)聯(lián)的等位基因和基因型。分析結(jié)果顯示,關(guān)節(jié)炎、盤狀紅斑、光敏感等臨床特征與IL-19基因rs2243188位點的等位基因、基因型無相關(guān)性(P均>0.05)。

10、r>　　結(jié)論:本研究實驗結(jié)果提示中國漢族人群IL-19基因rs2243188位點多態(tài)性與SLE遺傳易感性相關(guān)。IL-19基因rs2243188 C等位基因多態(tài)性可能降低中國漢族SLE患者發(fā)病的風(fēng)險。
　　研究二:L-19血清水平與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關(guān)性研究
　　目的:分析SLE患者組和正常對照組,狼瘡腎炎組和非狼瘡腎炎組,活動組和穩(wěn)定期病人之間血清IL-19表達(dá)水平的差異,探討SLE患者血清IL-19水平與SLE患者實驗室臨

11、床資料之間的相關(guān)性。
　　方法:SLE患者來自安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院(第一附屬醫(yī)院和附屬省立醫(yī)院)風(fēng)濕免疫科病人,共收集65例(男/女為6/59例)。SLE病人的診斷標(biāo)準(zhǔn)滿足美國風(fēng)濕病學(xué)會1997年修訂的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)。健康對照是從安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院健康體檢中心收集的與病例性別、年齡匹配的65例健康體檢者(男/女為7/58例)。所有研究對象經(jīng)過知情同意后,抽取外周靜脈血。運用ELISA技術(shù)檢測IL-19血清水平。兩獨立樣本

12、的t檢驗或Mann-Whitney秩和檢驗來分析IL-19表達(dá)水平在病例組和對照組的分布是否存在差異。統(tǒng)計分析軟件采用SPSS10.01軟件。檢驗水準(zhǔn)為α=0.05。
　　結(jié)果:(1)IL-19血清水平的比較病例組與健康對照組的血清IL-19濃度分別為:31.97(13.07,55.21)pg/mL和23.93(8.12,50.76)pg/mL,未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.328);SLE狼瘡腎炎組與非狼瘡腎炎組的血清IL-19濃度

13、分別為:39.40(9.45,55.44)pg/mL和30.22(8.66,55.21)pg/mL,未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.534);活動期與穩(wěn)定期SLE患者組血清IL-19濃度分別為:30.22(10.77,55.21)pg/mL和41.81(13.88,56.34)pg/mL,差異也無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.403)。
　　(2)IL-19血清水平與實驗室臨床資料對各臨床表型陽性組與陰性組血清IL-19水平進(jìn)行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),各組