三羥異黃酮調(diào)控miR-223、miR-27a抑制人胰腺癌細(xì)胞進(jìn)展的機(jī)制研究.pdf

1、背景與目的：胰腺癌是常見的消化道惡性腫瘤，五年生存率不到6％。吉西他濱是治療晚期胰腺癌最有效的藥物之一，雖然吉西他濱單用或者聯(lián)合其它化療藥物治療胰腺癌已經(jīng)被視為常規(guī)方案，但是由于副作用和化療耐藥的出現(xiàn)，總體上仍然未能明顯提高患者生存率。因此，尋找新的、更有效的治療胰腺癌的方法意義重大。本課題研究目的：（1）探討三羥異黃酮對人腺癌細(xì)胞PANC-1、BxPC-3、AsPC-1增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響。（2）探討三羥異黃酮是否通過下調(diào) m

2、iR-223表達(dá)影響胰腺癌細(xì)胞生長、凋亡、遷移和侵襲。（3）探討三羥異黃酮是否通過下調(diào)miR-27a表達(dá)影響胰腺癌細(xì)胞生長、凋亡、遷移和侵襲，進(jìn)而發(fā)揮其抗腫瘤作用。
　　方法：（1）以人腺癌細(xì)胞PANC-1、BxPC-3、AsPC-1為研究對象，采用噻唑藍(lán)比色法、流式細(xì)胞術(shù)、創(chuàng)傷愈合實驗和Transwell方法檢測三羥異黃酮對人腺癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響。（2）采用實時熒光定量PCR檢測三羥異黃酮對人胰腺癌細(xì)胞 miR-

3、223、miR-27a表達(dá)的影響。（3）通過脂質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)染 miRNA inhibitor分別下調(diào)胰腺癌細(xì)胞miR-223與miR-27a，研究相應(yīng)的miRNA在胰腺癌細(xì)胞中的作用機(jī)制。蛋白質(zhì)印跡實驗檢測Fbw7和FOXO1蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.三羥異黃酮能夠抑制細(xì)胞增殖并呈劑量依賴關(guān)系；三羥異黃酮能夠促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞凋亡；三羥異黃酮能夠抑制胰腺癌細(xì)胞遷移和侵襲能力。
　　2.三羥異黃酮下調(diào)了胰腺癌細(xì)胞miR-

4、223表達(dá)；三羥異黃酮通過下調(diào)miR-223抑制了胰腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲能力，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。三羥異黃酮通過下調(diào)miR-223上調(diào)了AsPC-1細(xì)胞中Fbw7蛋白表達(dá)。
　　3.三羥異黃酮下調(diào)了胰腺癌細(xì)胞miR-27a表達(dá)；三羥異黃酮通過下調(diào)miR-27a抑制了胰腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲能力，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。三羥異黃酮通過下調(diào)miR-27a上調(diào)了PANC-1細(xì)胞中FOXO1蛋白表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.三羥異黃酮能夠