版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、研究背景:
糖尿病性白內(nèi)障(diabetic cataract,DC)是糖尿病并發(fā)癥中僅次于視網(wǎng)膜病變的第二大致盲性眼病。糖尿病患者體內(nèi)積聚的大量晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end-products,AGEs)同其受體(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)結(jié)合后,能夠引起細(xì)胞內(nèi)活性氧簇合成增多、核因子轉(zhuǎn)錄活性增加等細(xì)胞反應(yīng),造成組織氧
2、化損傷、炎癥反應(yīng),是AGEs在人體內(nèi)發(fā)揮作用并導(dǎo)致疾病的一個重要途徑。
目的:本課題旨在通過觀察RAGE在糖尿病性白內(nèi)障、年齡相關(guān)性白內(nèi)障及正常晶狀體上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況,體外實驗研究AGEs對于人晶狀體上皮細(xì)胞氧化狀態(tài)以及RAGE表達(dá)的影響,初步探討兩者相互作用在糖尿病性白內(nèi)障發(fā)生發(fā)展中的作用及可能機制,為糖尿病性白內(nèi)障基礎(chǔ)研究及藥物防治提供新思路和實驗依據(jù)。
方法:
?。?)收集70例糖尿病性白內(nèi)障、72
3、例年齡相關(guān)性白內(nèi)障及24例正常晶狀體前囊膜;收集糖尿病性白內(nèi)障患者性別、年齡、糖尿病病程、糖化血紅蛋白水平、白內(nèi)障類型以及是否伴發(fā)糖尿病視網(wǎng)膜病變等6項臨床資料。采用免疫組化的方法檢測RAGE在糖尿病性白內(nèi)障、年齡相關(guān)性白內(nèi)障及正常晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá);分別比較并分析RAGE在糖尿病性白內(nèi)障、年齡相關(guān)性白內(nèi)障及正常晶狀體上皮細(xì)胞中的表達(dá)差異;使用logistic回歸分析法分析糖尿病患者晶狀體上皮細(xì)胞中RAGE表達(dá)同6項臨床資料間的相關(guān)
4、性。
?。?)體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞系(SRA01/04),實驗組分別加入濃度為0mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml的AGE-BSA;對照組則分別加入相同濃度梯度的對照牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),同細(xì)胞共孵育24h后:使用ROS檢測試劑盒,流式細(xì)胞技術(shù)觀測各組細(xì)胞內(nèi)ROS的含量;使用GSH及GSSG檢測試劑盒,比色法測算各組細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx比值;使用免疫印
5、記法檢測各組細(xì)胞中RAGE表達(dá)的情況。
?。?)體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞系(SRA01/04),實驗組加入濃度為0.5mg/ml的AGE-BSA;對照組加入相同濃度的對照BSA,分別觀察各組加入干預(yù)或?qū)φ赵噭┑?、2、8、16、24h后:ROS含量的變化,GSSG/GSx比值的改變以及RAGE的表達(dá)情況。
結(jié)果:
?。?)①糖尿病性白內(nèi)障及年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體前囊膜上皮細(xì)胞均可見有RAGE不同程度的陽性著
6、色。而透明晶狀體前囊膜則未見類似著色。RAGE在糖尿病性白內(nèi)障晶狀體及透明晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá)間存在顯著性差異(P<0.0125);RAGE在年齡相關(guān)性白內(nèi)障及透明晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá)間存在顯著性差異(P<0.0125);RAGE在糖尿病性白內(nèi)障晶狀體及年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá)間存在顯著性差異(P<0.0125)。
?、谂R床數(shù)據(jù)中糖尿病病程和糖化血紅蛋白水平,與RAGE表達(dá)情況的相關(guān)性具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0
7、5),并且這種相關(guān)性為正相關(guān)(OR>1),而其他4項包括患者性別、年齡、白內(nèi)障類型以及是否伴發(fā)有糖尿病視網(wǎng)膜病變同RAGE表達(dá)情況的相關(guān)性則不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
?。?)①隨著AGEs作用濃度的增加,ROS含量不斷增加,但在對照組,細(xì)胞內(nèi)ROS含量無明顯變化。在干預(yù)濃度為0mg/ml及0.25mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組細(xì)胞內(nèi)ROS含量無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);在干預(yù)濃度為0.50mg/ml及
8、1.00mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組ROS含量存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。隨著AGEs作用濃度的增加,細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx也不斷增加:實驗組細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx的比值,從初始干預(yù)濃度為0mg/ml時的1.7±0.26%,增長至干預(yù)濃度為1.00mg/m時的12.83±0.40%,而對照組則無明顯變化。在濃度為0mg/ml及0.25mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組GSSG/GSx無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0
9、.05);在濃度為0.50mg/ml及1.00mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組GSSG/GSx存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
②AGEs能夠誘導(dǎo)晶狀體上皮細(xì)胞RAGE在蛋白質(zhì)水平上的表達(dá)增加:隨著AGEs濃度的增加,晶狀體上皮細(xì)胞內(nèi)RAGE蛋白表達(dá)不斷增加;在AGEs濃度為0.5mg/ml及1.00mg/ml時,RAGE蛋白表達(dá)較對照組顯著增加(P<0.05)。
③隨著AGEs作用時間的增加,細(xì)胞內(nèi)R
10、OS含量不斷增加,這種增加在干預(yù)后0、2、8h時變化不明顯,而在干預(yù)后第16h及24h時ROS的增加則較為明顯。但在對照組,ROS的含量并無明顯變化。在干預(yù)后第16h及24h時,實驗組細(xì)胞內(nèi)ROS含量明顯高于對照組,存在明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。隨著AGEs作用時間的增加,細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx也不斷增加:實驗組細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx的比值,在干預(yù)后0h時的0.63±0.15%,增長至24h時的10.63±0.40%。但在對照組,
11、GSSG/GSx比值未出現(xiàn)明顯變化。在AGEs作用于細(xì)胞初始的8h內(nèi),細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx的比值增長迅速,而在其后的16h內(nèi),這種增長變得較為平緩。比較相同作用時間內(nèi)實驗組及對照組GSSG/GSx的比值,各組間具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
?、蹵GEs能夠誘導(dǎo)晶狀體上皮細(xì)胞RAGE在蛋白質(zhì)水平的表達(dá)增加:隨著AGEs作用時間的延長,RAGE表達(dá)水平不斷增高;在作用時間為16h及24h時,同對照組相比,表達(dá)具有統(tǒng)計學(xué)意義(P
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 糖基化終末產(chǎn)物及其受體軸體系在糖尿病性白內(nèi)障中的作用及機制.pdf
- 晚期糖基化終產(chǎn)物及其受體在2型糖尿病性骨質(zhì)疏松癥中的作用.pdf
- 晚期糖基化終末產(chǎn)物受體在Ⅱ型糖尿病大鼠種植體周圍骨組織的表達(dá).pdf
- 晚期糖基化終末產(chǎn)物受體及其配體HMGB1在大鼠重癥急性胰腺炎發(fā)病中的作用研究.pdf
- 晚期糖基化終產(chǎn)物在糖尿病腎病中的作用及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制研究.pdf
- 晶狀體內(nèi)晚期糖基化終末產(chǎn)物量與糖尿病病情的相關(guān)性研究.pdf
- 脂肪酸與晚期糖基化終末產(chǎn)物在骨質(zhì)疏松癥發(fā)病中的研究.pdf
- 晚期糖基化終末產(chǎn)物及其受體信號傳導(dǎo)通路在慢性氟中毒神經(jīng)損傷中的作用.pdf
- 皮膚晚期糖基化終末產(chǎn)物與2型糖尿病血管病變的相關(guān)性研究.pdf
- 高級糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)對糖尿病胰島β細(xì)胞損傷的作用研究.pdf
- 晚期糖化終末產(chǎn)物在糖尿病性骨質(zhì)疏松癥發(fā)病中的作用及補腎中藥防治的研究.pdf
- 晚期糖基化終未產(chǎn)物受體在姜黃素治療Ⅱ型糖尿病神經(jīng)痛大鼠中的作用.pdf
- 晶體糖基化終末產(chǎn)物與糖尿病視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性研究.pdf
- 人晚期糖基化終末產(chǎn)物ageselisa試劑盒
- 葉酸對糖尿病大鼠腎臟高級糖基化終末產(chǎn)物與受體及腎功能的影響.pdf
- 維生素e對糖尿病大鼠高級糖基化終末產(chǎn)物及其受體和腎功的影響
- 可溶性晚期糖基化終產(chǎn)物受體與糖尿病合并冠心病的相關(guān)性研究.pdf
- 晚期糖基化終末產(chǎn)物受體基因多態(tài)性與膿毒癥相關(guān)性研究.pdf
- 糖尿病性白內(nèi)障
- 非酶糖基化終末產(chǎn)物與糖尿病視網(wǎng)膜病變相關(guān)性研究.pdf
評論
0/150
提交評論