2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景:
  糖尿病性白內(nèi)障(diabetic cataract,DC)是糖尿病并發(fā)癥中僅次于視網(wǎng)膜病變的第二大致盲性眼病。糖尿病患者體內(nèi)積聚的大量晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end-products,AGEs)同其受體(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)結(jié)合后,能夠引起細(xì)胞內(nèi)活性氧簇合成增多、核因子轉(zhuǎn)錄活性增加等細(xì)胞反應(yīng),造成組織氧

2、化損傷、炎癥反應(yīng),是AGEs在人體內(nèi)發(fā)揮作用并導(dǎo)致疾病的一個重要途徑。
  目的:本課題旨在通過觀察RAGE在糖尿病性白內(nèi)障、年齡相關(guān)性白內(nèi)障及正常晶狀體上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況,體外實驗研究AGEs對于人晶狀體上皮細(xì)胞氧化狀態(tài)以及RAGE表達(dá)的影響,初步探討兩者相互作用在糖尿病性白內(nèi)障發(fā)生發(fā)展中的作用及可能機制,為糖尿病性白內(nèi)障基礎(chǔ)研究及藥物防治提供新思路和實驗依據(jù)。
  方法:
 ?。?)收集70例糖尿病性白內(nèi)障、72

3、例年齡相關(guān)性白內(nèi)障及24例正常晶狀體前囊膜;收集糖尿病性白內(nèi)障患者性別、年齡、糖尿病病程、糖化血紅蛋白水平、白內(nèi)障類型以及是否伴發(fā)糖尿病視網(wǎng)膜病變等6項臨床資料。采用免疫組化的方法檢測RAGE在糖尿病性白內(nèi)障、年齡相關(guān)性白內(nèi)障及正常晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá);分別比較并分析RAGE在糖尿病性白內(nèi)障、年齡相關(guān)性白內(nèi)障及正常晶狀體上皮細(xì)胞中的表達(dá)差異;使用logistic回歸分析法分析糖尿病患者晶狀體上皮細(xì)胞中RAGE表達(dá)同6項臨床資料間的相關(guān)

4、性。
 ?。?)體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞系(SRA01/04),實驗組分別加入濃度為0mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml的AGE-BSA;對照組則分別加入相同濃度梯度的對照牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),同細(xì)胞共孵育24h后:使用ROS檢測試劑盒,流式細(xì)胞技術(shù)觀測各組細(xì)胞內(nèi)ROS的含量;使用GSH及GSSG檢測試劑盒,比色法測算各組細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx比值;使用免疫印

5、記法檢測各組細(xì)胞中RAGE表達(dá)的情況。
 ?。?)體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細(xì)胞系(SRA01/04),實驗組加入濃度為0.5mg/ml的AGE-BSA;對照組加入相同濃度的對照BSA,分別觀察各組加入干預(yù)或?qū)φ赵噭┑?、2、8、16、24h后:ROS含量的變化,GSSG/GSx比值的改變以及RAGE的表達(dá)情況。
  結(jié)果:
 ?。?)①糖尿病性白內(nèi)障及年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者晶狀體前囊膜上皮細(xì)胞均可見有RAGE不同程度的陽性著

6、色。而透明晶狀體前囊膜則未見類似著色。RAGE在糖尿病性白內(nèi)障晶狀體及透明晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá)間存在顯著性差異(P<0.0125);RAGE在年齡相關(guān)性白內(nèi)障及透明晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá)間存在顯著性差異(P<0.0125);RAGE在糖尿病性白內(nèi)障晶狀體及年齡相關(guān)性白內(nèi)障晶狀體上皮細(xì)胞上的表達(dá)間存在顯著性差異(P<0.0125)。
 ?、谂R床數(shù)據(jù)中糖尿病病程和糖化血紅蛋白水平,與RAGE表達(dá)情況的相關(guān)性具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0

7、5),并且這種相關(guān)性為正相關(guān)(OR>1),而其他4項包括患者性別、年齡、白內(nèi)障類型以及是否伴發(fā)有糖尿病視網(wǎng)膜病變同RAGE表達(dá)情況的相關(guān)性則不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
 ?。?)①隨著AGEs作用濃度的增加,ROS含量不斷增加,但在對照組,細(xì)胞內(nèi)ROS含量無明顯變化。在干預(yù)濃度為0mg/ml及0.25mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組細(xì)胞內(nèi)ROS含量無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);在干預(yù)濃度為0.50mg/ml及

8、1.00mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組ROS含量存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。隨著AGEs作用濃度的增加,細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx也不斷增加:實驗組細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx的比值,從初始干預(yù)濃度為0mg/ml時的1.7±0.26%,增長至干預(yù)濃度為1.00mg/m時的12.83±0.40%,而對照組則無明顯變化。在濃度為0mg/ml及0.25mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組GSSG/GSx無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0

9、.05);在濃度為0.50mg/ml及1.00mg/ml時,作用24h后,實驗組及對照組GSSG/GSx存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
  ②AGEs能夠誘導(dǎo)晶狀體上皮細(xì)胞RAGE在蛋白質(zhì)水平上的表達(dá)增加:隨著AGEs濃度的增加,晶狀體上皮細(xì)胞內(nèi)RAGE蛋白表達(dá)不斷增加;在AGEs濃度為0.5mg/ml及1.00mg/ml時,RAGE蛋白表達(dá)較對照組顯著增加(P<0.05)。
  ③隨著AGEs作用時間的增加,細(xì)胞內(nèi)R

10、OS含量不斷增加,這種增加在干預(yù)后0、2、8h時變化不明顯,而在干預(yù)后第16h及24h時ROS的增加則較為明顯。但在對照組,ROS的含量并無明顯變化。在干預(yù)后第16h及24h時,實驗組細(xì)胞內(nèi)ROS含量明顯高于對照組,存在明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。隨著AGEs作用時間的增加,細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx也不斷增加:實驗組細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx的比值,在干預(yù)后0h時的0.63±0.15%,增長至24h時的10.63±0.40%。但在對照組,

11、GSSG/GSx比值未出現(xiàn)明顯變化。在AGEs作用于細(xì)胞初始的8h內(nèi),細(xì)胞內(nèi)GSSG/GSx的比值增長迅速,而在其后的16h內(nèi),這種增長變得較為平緩。比較相同作用時間內(nèi)實驗組及對照組GSSG/GSx的比值,各組間具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
 ?、蹵GEs能夠誘導(dǎo)晶狀體上皮細(xì)胞RAGE在蛋白質(zhì)水平的表達(dá)增加:隨著AGEs作用時間的延長,RAGE表達(dá)水平不斷增高;在作用時間為16h及24h時,同對照組相比,表達(dá)具有統(tǒng)計學(xué)意義(P

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