地西他濱聯(lián)合曲古抑菌素A對SKM-1 MDS細胞株的體外研究.pdf

1、目的：本研究探討去甲基化制劑地西他濱(5-aza-2'-deoxycytidine，Decitabine)和(或)組蛋白去乙?；敢种苿┣乓志谹(TSA，TrichostatinA)對MDS-RAEB細胞株SKM.1株的體外影響以及機制。 方法： 1.用臺酚藍拒染法研究地西他濱和(或)TSA對SKM-1細胞生長曲線的影響。 2.用NBT(硝基四氮唑藍)還原試驗研究地西他濱和(或)TSA對SKM.1細胞分化作用

2、。 3.用流式細胞技術研究地西他濱和(或)TSA作用前后，SKM-1細胞株表面分化抗原的變化。 4.用AnnexinV-FITC標記地西他濱和(或)TSA作用后的SKM-1細胞，并用流式細胞儀分析，了解其早期凋亡的情況。 5.用RT-PCR研究地西他濱和(或)TSA作用前后，SKM.1細胞Fas和P15INK4B基因表達的變化，了解藥物對細胞凋亡和分化的影響。 結果： 1.地西他濱和(或)TSA對

3、SKM-1細胞有生長抑制作用(P＜0.05)。 2.地西他濱和(或)TSA能促進SKM-1細胞分化。SKM-1細胞經1.6-6.4mmol/L的地西他濱或50-200nmol/L的TSA處理5天后，NBT還原能力明顯增加(P＜O.01)，兩藥聯(lián)用高于單藥(P＜O.01)。 3.經1.6-6.4mmol/L的地西他濱或50-200nmol/L的TSA處理5天后，流式細胞儀檢測到SKM-1細胞表面CDl4、CDllb表達增加

4、(P＜O.01，P＜0.05)，HLA-DR表達減少(P＜O.01，P＜0.05)。兩藥聯(lián)用高于單藥(P<0.05)。 4.流式細胞儀分析經1.6-6.4mmol/L地西他濱或100-200nmol/L的TSA處理后，SKM.1細胞凋亡增加(P＜O.01,P<0.01)，有劑量依賴(P＜0.05，P＜0.01)，兩藥有協(xié)同性(P＜O.01)。 5.經3.2-6.4mmol/L的地西他濱或50-200nmol/L的TSA處

5、理5天后，細胞FasmRNA表達增加(P