4-苯基丁酸對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷的影響.pdf

1、目的：
　　在前期實(shí)驗(yàn)建立四氯化碳誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)中予以小鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑4-苯基丁酸（PBA）干預(yù)，探討PBA對(duì)四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)急性肝損傷的影響，研究?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞壞死、凋亡及增殖的影響，并闡明部分機(jī)制。
　　方法：
　　將60只成年健康雄性ICR小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、PBA組、CCl412 h組、CCl424 h組、CCl448 h組、CCl472 h組、PBA+CCl412 h組

2、、PBA+CCl424 h組、PBA+CCl448 h組、PBA+CCl472 h組，每組6只小鼠。對(duì)CCl4組及PBA+CCl4組小鼠經(jīng)腹腔注射CCl4（300μl/kg），PBA+CCl4組小鼠在給予CCl4前經(jīng)腹腔注射給予 PBA（400mg/kg）處理。在CCl4處理后相應(yīng)時(shí)點(diǎn)采集血液、處死小鼠、采集肝臟組織。檢測(cè)小鼠血液中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平，使用蘇木精-伊紅（HE）染色法分析肝臟病理學(xué)改變，免疫組化檢測(cè)肝臟增殖細(xì)胞核抗

3、原（PCNA）分布，檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)肝臟葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（GRP78）、C/EBP家族同源蛋白（CHOP）、磷酸化真核生物翻譯起始因子2α（p-eIF2α）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）、磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶B（p-akt）及核因子-kappa B p65（NF-κB p65）蛋白水平。
　　結(jié)果：
　　與對(duì)照組比較，CCl4組小鼠肝臟ALT明顯升高。與C

4、Cl4組比較，不同時(shí)點(diǎn)的 PBA+CCl4組小鼠肝臟ALT水平有不同程度地降低，其中24 h時(shí)點(diǎn)最明顯[ALT：（7423.81±581.75）U/L與（2876.19±179.76）U/L；t=14.984，P<0.01]，而小鼠肝重體重比僅在48 h時(shí)點(diǎn)存在明顯差異[（0.072±0.001）與（0.064±0.004）；t=3.915，P<0.01]；病理學(xué)及TUNEL技術(shù)檢測(cè)凋亡結(jié)果顯示：在24 h時(shí)點(diǎn)肝細(xì)胞凋亡最明顯；PBA處

5、理可減輕CCl4引起的肝細(xì)胞壞死及凋亡程度；Western blot結(jié)果顯示PBA處理可降低肝臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白分子（GRP78、p-eIF2α、CHOP、p-JNK）水平（P<0.01）。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，CCl4處理后48 h及72 h時(shí)點(diǎn)肝細(xì)胞增殖明顯，肝細(xì)胞增殖相關(guān)的p-akt、PCNA及NF-κB p65蛋白水平明顯升高，與CCl4組相比，PBA+CCl4組與肝細(xì)胞增殖相關(guān)的p-akt、PCNA及NF-κB p65蛋白水平明顯