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1、該實驗采用逆轉(zhuǎn)錄病毒作為表達載體,首先,通過RT-PCR合成人ANG成熟肽cDNA,再將cDNA反向插入逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,獲得重組質(zhì)粒載體,經(jīng)PA317包裝細胞包裝假病毒轉(zhuǎn)染目的細胞A549,利用逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染效率高,外源基因表達穩(wěn)定等優(yōu)點,以達到抑制細胞內(nèi)ANG蛋白的表達,從而是在根本上阻斷腫瘤細胞分泌ANG所引起的異常血管增生,達到抑制腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移的目的,為將反義ANG基因應(yīng)用于抗血管生成的基因治療奠定了基礎(chǔ).1.應(yīng)用RT-PCR成
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