中緬邊境間日瘧原蟲氯喹敏感性研究.pdf

1、目的：調(diào)查中緬邊境間日瘧原蟲氯喹敏感性及其可能分子標(biāo)志物 Pvmdr1的基因多態(tài)性。
　　方法：⑴將分離自中緬邊境經(jīng)鏡檢與PCR確認(rèn)的間日瘧患者的血樣進(jìn)行短期體外培養(yǎng)，采用微量法檢測(cè)間日瘧原蟲對(duì)氯喹的藥物敏感性，并計(jì)算各間日瘧原蟲樣本的氯喹IC50值。⑵應(yīng)用PCR擴(kuò)增間日瘧原蟲多重耐藥蛋白1（Pvmdr1）基因片段、產(chǎn)物測(cè)序，與標(biāo)準(zhǔn)株Salvador I進(jìn)行序列比對(duì)，并分析結(jié)果。
　　結(jié)果：①40例中緬邊境間日瘧原蟲氯喹IC

2、50值2.116~713.2nM，幾何均數(shù)（Geometric mean）、95％CI（95% CI of geo. Mean）及中位數(shù)（Median）分別為88.82nM、59.3~133nM和86.82nM。其中8例間日瘧原蟲樣本氯喹IC50大于220nM。②成功擴(kuò)增并測(cè)序上述進(jìn)行氯喹敏感性測(cè)定樣本中25例樣本的Pvmdr1基因，經(jīng)過序列比對(duì)分析，發(fā)現(xiàn)3例存在Y976F突變（突變率為12.00%），16例存在F1076L突變（突變率

3、為64.00%），3例Y976F、F1076L雙突變（突變率為12.00%）。③氯喹IC50大于220nM的8例樣本中6例測(cè)序成功，其中1例存在Y976F突變（突變率為16.67%）、4例存在F1076L突變（突變率為66.67%），1例Y976F、F1076L雙突變（突變率為16.67%）；而氯喹IC50小于220nM的32例樣本中19例擴(kuò)增并測(cè)序成功，其中2例存在Y976F突變（突變率為10.53%），12例存在F1076L突變（突

4、變率為63.16%），2例Y976F、F1076L雙突變（突變率為10.53%）；在氯喹IC50大于220nM的樣本中與氯喹IC50小于220nM的樣本之間Pvmdr1基因Y976F突變率、F1076L突變率及Y976F、F1076L雙突變率均無顯著差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：⑴中緬邊境地區(qū)存在氯喹敏感性降低的間日瘧原蟲蟲株。⑵中緬邊境間日瘧原蟲Pvmdr1基因存在Y976F突變、F1076L突變以及Y976F、F1076L