魚(yú)藤根中魚(yú)藤素的提取分離、抗腫瘤活性篩選及其構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、本文以魚(yú)藤根為對(duì)象，研究抗腫瘤活性成分魚(yú)藤素的提取、分離、色譜光譜特征、抗腫瘤活性、穩(wěn)定性及構(gòu)效關(guān)系。 第一章對(duì)魚(yú)藤素的結(jié)構(gòu)、提取分離、生物活性、自然資源、組織培養(yǎng)技術(shù)、超臨界流體提取、分子模擬等進(jìn)行了較為詳細(xì)的論述。 第二章采用超聲波輔助浸提、索氏提取、振蕩抽提3種方法提取魚(yú)藤根中的魚(yú)藤酮類化合物，應(yīng)用柱層析、薄層層析，比較不同展開(kāi)劑分離植物提取物中魚(yú)藤酮類化合物的效果，HPLC檢測(cè)各組分中魚(yú)藤素的相對(duì)含量。結(jié)果表明：

2、超聲波輔助提取、索氏提取過(guò)程中選擇氯仿為浸提劑較為適宜，振蕩提取時(shí)采用丙酮為浸提劑可最大量提取植物根中魚(yú)藤素，且雜質(zhì)含量相對(duì)較少。以石油醚：乙酸乙酯：氯仿(6:1:1)為展開(kāi)劑，可以較好的將魚(yú)藤素與其他魚(yú)藤酮類化合物分離。 第三章探索了超臨界CO2流體萃取技術(shù)在提取魚(yú)藤根中魚(yú)藤素上的應(yīng)用，對(duì)不同粒度、提取時(shí)間、夾帶劑、夾帶劑用量、夾帶劑加入方式、提取壓力、提取溫度、CO2流量等條件下提取魚(yú)藤根中魚(yú)藤素進(jìn)行研究，建立超臨界CO2流

3、體提取魚(yú)藤素的最優(yōu)工藝。結(jié)果顯示：魚(yú)藤根粒度30目、提取30min、直接向萃取釜中加入9ml甲醇、提取壓力30MPa、溫度55℃、CO2流速25kg/h條件下，每10克魚(yú)藤干粉提取出來(lái)的魚(yú)藤素相對(duì)含量最高。提取率是氯仿浸提的1.6倍。 第四章分別使用HPLC、UV、MS、FT-IR、1H NMR測(cè)定魚(yú)藤素的指紋圖譜特征。結(jié)果表明，魚(yú)藤素分子量為394，魚(yú)藤素UV光譜最大吸收峰為271.6nm。 第五章比較并分析了魚(yú)藤素對(duì)

4、人急性白血病細(xì)胞系K562細(xì)胞株、人結(jié)腸癌細(xì)胞系BEL-7402細(xì)胞株、人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞株的細(xì)胞增殖抑制測(cè)定。結(jié)果表明，魚(yú)藤素能顯著抑制人急性白血病細(xì)胞系K562細(xì)胞株和人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞株，但對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞系BEL-7402細(xì)胞株抑制率較低。 第六章比較了魚(yú)藤素及其結(jié)構(gòu)類似物--羥基魚(yú)藤素、脫氫魚(yú)藤素在不同溶劑中的溶解性；同時(shí)采用高效液相色譜分析羥基魚(yú)藤素、魚(yú)藤素、脫氫魚(yú)藤素的光穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性、微波穩(wěn)定性和耐酸

5、堿性。結(jié)果表明，羥基魚(yú)藤素、魚(yú)藤素、脫氫魚(yú)藤素在甲醇、乙醇、乙二醇、乙腈、丙酮、氯仿、四氯化碳、乙酸乙酯中具有良好的溶解性；光照條件下，魚(yú)藤素發(fā)生不同程度的分解，羥基魚(yú)藤素、脫氫魚(yú)藤素則較為穩(wěn)定；80℃水域加熱、微波均未對(duì)羥基魚(yú)藤素、魚(yú)藤素、脫氫魚(yú)藤產(chǎn)生影響；酸性條件下，三者也相對(duì)較穩(wěn)定，堿性條件下，魚(yú)藤素結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。 第七章應(yīng)用熱力學(xué)研究魚(yú)藤素合成途徑中能量的變化，采用HyperChem模擬軟件計(jì)算各反應(yīng)過(guò)程中吸收、釋放能量

6、的大小。為魚(yú)藤素全合成的改進(jìn)提供理論依據(jù)。 第八章應(yīng)用分子模擬技術(shù)，采用分子力學(xué)優(yōu)化魚(yú)藤素分子構(gòu)象，經(jīng)分子動(dòng)力學(xué)、Semi-empirical方法模擬計(jì)算魚(yú)藤素分子不同外場(chǎng)下能量變化及電荷分布。模擬結(jié)果表明，魚(yú)藤素在超低溫條件下可與水分子形成氫鍵，室溫下不易與水形成氫鍵。Semi-empirical理論CNDO/2方法預(yù)測(cè)結(jié)果顯示，魚(yú)藤素C環(huán)上的羰基易發(fā)生親電反應(yīng)。 第九章探討了魚(yú)藤根氯仿提取物、魚(yú)藤素在硅膠上的熱力學(xué)和