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文檔簡介
1、惡性腫瘤嚴重威脅人類健康，亟需發(fā)展多種治療方法改善腫瘤的預后。PUMA(p53up-regulatedmodulatorofapoptosis)是2001年報道發(fā)現(xiàn)的具有快速強大促凋亡作用的p53下游基因。本研究旨在探討載有PUMA的復制缺陷型腺病毒(Ad-PUMA)用于治療惡性腫瘤的可行性，檢測Ad-PUMA與化療藥合用對腫瘤細胞的增效作用及可能機制，并與Ad-p53進行比較。結(jié)果表明在p53狀態(tài)不同的食管癌細胞系、HPV狀態(tài)不同的宮
2、頸癌細胞系中，Ad-PUMA均比Ad-p53顯現(xiàn)更強大的細胞生長抑制作用；Ad-PUMA在多種組織來源的腫瘤細胞中可增強化療藥的療效；在人食管癌細胞系KYSE150細胞中證實Ad-PUMA與化療藥物合用有協(xié)同作用，裸鼠移植瘤實驗結(jié)果表明Ad-PUMA比Ad-p53化療增效作用更強。外源PUMA的導入不影響化療藥對細胞周期造成的改變，但可加強化療藥誘導的凋亡。PUMA的促凋亡作用是通過誘導Bax寡聚化、激活Caspase9實現(xiàn)的，Bcl-
3、2高表達可減弱Ad-PUMA對細胞的生長抑制作用。 廣泛用于基因治療的腺病毒載體Ad5和Ad2主要通過柯薩奇腺病毒受體(coxsackieadenovirusreceptor，CAR)感染宿主細胞。CAR在不同腫瘤細胞膜上的表達水平并不相同，這種差異有可能影響腺病毒的感染效率。本研究通過熒光顯微鏡、流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)載有綠色熒光蛋白的Ad5型腺病毒Ad-GFP對不同種、甚至同種上皮來源的惡性腫瘤細胞系的感染效率差異較大，感染效率
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