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文檔簡介
1、本論文建立了諾龍化學發(fā)光免疫分析方法,并能同時檢測群勃龍、丙酸諾龍、雄諾龍、美雄諾龍其他四種蛋白同化激素。
在諾龍多克隆抗體制備基礎上,對化學發(fā)光免疫分析中的主要參數(shù)進行了優(yōu)化,即抗體包被量、酶標抗原的濃度、樣品稀釋液以及發(fā)光底物的種類及濃度。建立了諾龍化學發(fā)光酶聯(lián)免疫分析方法,并對方法的性能指標進行了系統(tǒng)評價。該方法能同時檢測諾龍、群勃龍、丙酸諾龍、雄諾龍、美雄諾龍五種蛋白同化激素,且具有很高的靈敏度,其中諾龍IC50=0.
2、050μg/L,IC15=0.00378μg/L、群勃龍IC50=0.094μg/L,IC15=0.00330μg/L、丙酸諾龍IC50=0.66μg/L,IC15=0.259μg/L、雄諾龍IC50=1.40μg/L,IC15=0.0398μg/L、美雄諾龍IC50=2.40μg/L,IC15=0.078μg/L,與傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附分析方法相比,靈敏度提高了5~8倍,該檢測方法的變異系數(shù)在20%以下。
選取了豬肉、雞肉和牛肉
3、作為檢測樣品,通過甲醇提取,磷酸鹽緩沖液稀釋,即可消除樣品的基質影響。實際樣品中諾龍的平均回收率為83.2%~94.2%,表明方法的準確性。同時與傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附測定方法的檢測結果比較,相關系數(shù)R2=0.9988;進一步利用高效液相色譜法對建立的諾龍化學發(fā)光酶免疫分析方法的準確性進行了驗證,兩種方法檢測結果的線性相關系數(shù)R2值0.9816,研究結果說明所建立的諾龍化學發(fā)光酶免疫分析方法的準確性,能用于動物源性食品中諾龍類物質的快速檢測。
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