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文檔簡介
1、聚γ-谷氨酸(Poly-γ-glutamieacid;γ-PGA)是微生物產(chǎn)生的一種胞外氨基酸聚合物,由L-谷氨酸(L-Glu)、D-谷氨酸(D-Glu)通過γ-酰胺鍵結(jié)合形成。聚γ-谷氨酸具有生物相容性、生物可降解性、可食用且對人體和環(huán)境無毒害等優(yōu)點。可作為生物絮凝劑、增稠劑、加濕劑、藥物載體、藥物緩釋劑、生物可降解纖維、高吸水性樹脂、重金屬吸收劑以及食品添加劑等廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、藥物工業(yè)、化妝品工業(yè)及污水處理中,是一種應(yīng)用前景非常
2、廣闊的新型生物制品。本課題對γ-PGA產(chǎn)生菌的篩選和鑒定、發(fā)酵條件的優(yōu)化以及γ-PGA提取純化和表征進行了研究。主要研究結(jié)果如下: 以表觀粘度作為篩選指標,從一豆瓣醬樣品中分離篩選到一株產(chǎn)γ-PGA的菌株L536,其發(fā)酵液的粘度可達0.41帕·秒。發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)紙層析、氨基酸分析等鑒定,表明由單一谷氨酸聚合而成。依據(jù)菌落形態(tài)、菌體形態(tài)、生理生化特征以及16SrDNA基因序列分析的結(jié)果,菌株L536初步鑒定為解淀粉芽孢桿菌。國內(nèi)還未見
3、有解淀粉芽孢桿菌產(chǎn)γ-PGA的報道。 采用單因素試驗和正交試驗對菌株L536產(chǎn)γ-PGA的發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化,確定了最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(g/L):檸檬酸鈉18,谷氨酸鈉40,豆粕粉40,氯化鈉15,氯化銨7,MgSO4·7H2O0.9,K2HPO40.5,MnSO4·H2O0.2,Cacl2·2H2O0.2;確定了較優(yōu)培養(yǎng)條件為:初始值pH7.0,培養(yǎng)溫度37℃,搖瓶裝液量35mL/250mL三角瓶,搖床轉(zhuǎn)速200
4、r/min,接種量3%(V/V),發(fā)酵時間47h。菌株L536在最佳培養(yǎng)基和較優(yōu)培養(yǎng)條件下培養(yǎng),發(fā)酵液的表觀粘度達到1.6帕·秒,與優(yōu)化前相比較,粘度提高了3倍多,γ-PGA的產(chǎn)量從15g/L提高到22.57g/L。 初步研究了γ-PGA的分離純化過程,確定了分離純化的路線。通過離心除菌體、兩次乙醇沉淀、透析除鹽、冷凍干燥得到純化樣品,經(jīng)分析其純度可達93%。 采用紙層析、紫外掃描和紅外光譜等方法對純化的γ-PGA樣品進
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