肝靶向半乳糖化殼寡糖納米粒的制備與初步評(píng)價(jià).pdf

1、藥物靶向肝臟有被動(dòng)靶向及受體介導(dǎo)的主動(dòng)靶向兩種方式。本文將上述兩種靶向原理相結(jié)合，以合成的具有肝臟靶向性的半乳糖化殼寡糖作為載體材料，使用微乳化—凝膠法制備了適合包裹水溶性陰離子藥物的肝靶向殼寡糖納米粒。 以半乳糖為原料，經(jīng)乙?；?、溴代、縮合、置換、加醇等反應(yīng)，合成了具有肝靶向意義的半乳糖苷：2—亞氨基-2-甲氧基乙基—1—硫代-β—D—半乳吡喃糖苷(2—imino-2-methoxyethyl—1-Thio—galactose

2、，IME-Thio—galactose)。首次使用IME-Thio—galactose對(duì)殼寡糖的氨基進(jìn)行了修飾以合成具有肝靶向性質(zhì)的載體材料—半乳糖化殼寡糖，并以IR、DSC及1H—NMR等方法對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。 研究了微乳化—凝膠法用于制備包裹水溶性藥物的殼寡糖納米粒，發(fā)現(xiàn)由于殼寡糖在水溶液中帶有正電荷，在靜電吸引的作用下，該方法制備的納米粒對(duì)陰離子藥物能得到較高的包封率。以span—80為乳化劑，甘油為助乳化劑，液體石蠟為

3、油相，先對(duì)殼寡糖水溶液進(jìn)行微乳化制備W/O微乳，然后加入Na2SO4溶液對(duì)殼寡糖進(jìn)行膠凝，得到殼聚糖納米粒。采用甘草酸二銨為模型藥物，按最佳處方制得的甘草酸二銨殼寡糖納米粒(DG—COS—NPs)平均包封率88.3％，載藥量為29.4％。同法，使用半乳糖化殼寡糖的1％醋酸溶液代替殼寡糖水溶液，制得甘草酸二銨半乳糖化殼寡糖納米粒(DG—GAL—COS—NPs)，包封率為87.4％，載藥量29.1％。 測(cè)定了DG—COS—NPs和D

4、G—GAL—COS—NPs在生理鹽水中的平均pH值均在6.0左右。采用激光粒度儀測(cè)定粒徑分布，DG—GAL—COS—NPs的平均粒徑在72.8nm，顯示為單峰分布。用1％磷鎢酸溶液染色，固定5min，于透射電鏡下觀察納米粒的形態(tài)并照相，結(jié)果表明，DG—GAL—COS—NPs呈球形或類球形，分布較均勻，相互之間無粘連。加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明，兩種納米粒凍干制劑在(25±2)℃加速試驗(yàn)條件下和(4±2)℃長(zhǎng)期穩(wěn)定條件下放置3個(gè)月，外觀

5、、pH值、粒徑和包封率均無顯著性變化，穩(wěn)定性良好。在去離子水中，納米粒在10min內(nèi)突釋16％，然后釋藥緩慢，48h時(shí)僅釋放38％；然而在PBS緩沖液(pH=7.0，150mmol/L)中，48h時(shí)能夠釋藥完全(91％)。根據(jù)其釋藥規(guī)律推測(cè)甘草酸二銨殼寡糖納米粒的釋藥機(jī)制為依賴離子交換作用釋放藥物。 使用溶血性試驗(yàn)和細(xì)胞毒性試驗(yàn)(MTT法)初步驗(yàn)證了COS—NPs和GAL—COS—NPs兩種納米粒的安全性。小鼠體內(nèi)分布試驗(yàn)結(jié)果表

6、明：靶向組(DG—GAL—COS—NPs)與未修飾對(duì)照組(DG—COS—NPs)都具有較高的肝臟累積藥物濃度。對(duì)照組受粒徑大小的影響，具有肝臟的被動(dòng)靶向性，靶向組經(jīng)半乳糖修飾后，較對(duì)照組，其肝臟靶向效率提高了1.52倍，表明半乳糖化殼寡糖納米?？杀蝗ネ僖核崽堑鞍资荏w識(shí)別而被肝細(xì)胞主動(dòng)攝取。采用COS—NPs和GAL—COS—NPs包裹熒光物質(zhì)—熒光素二鈉作為標(biāo)記，給藥后30min處死小鼠，制備肝組織切片，熒光顯微鏡下觀察熒光分布和強(qiáng)度，