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文檔簡介
1、目的:研究冬凌草甲素對人肝癌細胞株SMMC-7721細胞的抑制作用及誘導凋亡機制。
方法:采用不同濃度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721細胞,四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞抑制率,應用流式細胞術檢測細胞周期和凋亡,倒置顯微鏡和共聚焦顯微鏡觀察細胞凋亡時的形態(tài)學變化,RT-PCR方法檢測細胞Survivin、Bc1-2、Bax mRNA的表達,Western Blot法檢測細胞Survivin、Bc1-2、Bax
2、蛋白表達。
結果:MTT比色法顯示不同濃度的冬凌草甲素可抑制人肝癌SMMC-7721細胞增殖,抑制作用呈時間和劑量依賴性。流式細胞術檢測人肝癌SMMC-7721細胞經(jīng)冬凌草甲素作用48小時后可見細胞周期有明顯變化,G0/G1期細胞比例上升,S期細胞比例下降,呈濃度依賴性,并隨著藥物濃度變化表現(xiàn)出特異性的凋亡形態(tài)學改變.RT-PCR法和Western Blot法顯示,人肝癌SMMC-7721細胞Bax mRNA和Bax蛋白隨
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