聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者臨床特征及SLC17A8基因型與表型的臨床意義研究.pdf

1、聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙(Auditory neuropathy spectrum disorder,ANSD),是一種聲音信號(hào)不能同步地從內(nèi)耳傳輸?shù)酱竽X的感音神經(jīng)性耳聾,由內(nèi)毛細(xì)胞和聽(tīng)神經(jīng)突觸和/或聽(tīng)神經(jīng)功能不良所致,也稱聽(tīng)神經(jīng)病(Auditory neuropathy,AN)。聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙有著特殊臨床表型和聽(tīng)力學(xué)特征,主要包括言語(yǔ)識(shí)別率與純音聽(tīng)力不成比例的明顯下降,誘發(fā)性耳聲發(fā)射和/或耳蝸微音器電位正常,而耳聲發(fā)射對(duì)側(cè)聲抑制效應(yīng)消失,聽(tīng)

2、性腦干反應(yīng)缺失或嚴(yán)重異常,中耳鐙骨肌聲反射引不出或閾值明顯升高等。聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者除聽(tīng)力障礙以外,還常伴有前庭功能異常、耳鳴、視神經(jīng)病、周?chē)窠?jīng)病等疾患。
　　聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙病因雖尚不明確,但研究發(fā)現(xiàn)環(huán)境因素和遺傳因素均可在發(fā)病中起到重要的作用。已被目前研究所證實(shí)的環(huán)境因素主要有新生兒高膽紅素血癥、圍產(chǎn)期缺氧或窒息、感染、免疫性疾病、耳毒性藥物等。而隨著分子遺傳學(xué)的迅速發(fā)展,10余種聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙相關(guān)基因被鑒定,OTOF基

3、因是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的、同時(shí)也是被認(rèn)為最常見(jiàn)的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙相關(guān)基因。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),SLC17A8(Solute carrier family 17,member8)基因與OTOF基因的表達(dá)部位及作用機(jī)制十分相似,同時(shí)SLC17A8基因缺陷的動(dòng)物模型也表現(xiàn)出類聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙的聽(tīng)力學(xué)表型,提示SLC17A8基因與聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙的關(guān)系密切,可能是尚未被發(fā)現(xiàn)的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙相關(guān)新基因。
　　本研究主要包括聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者臨床特

4、征研究、聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者SLC17A8基因表型與基因型的臨床意義研究?jī)刹糠?旨在從臨床表型特點(diǎn)和遺傳學(xué)兩方面對(duì)聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙進(jìn)行深入了解。
　　聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者臨床特征研究主要針對(duì)誘發(fā)中國(guó)人群聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙發(fā)病的危險(xiǎn)因素、聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙人群的耳鳴發(fā)生情況及特點(diǎn),以及伴發(fā)周?chē)窠?jīng)病的綜合征型聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙的家系特征三方面進(jìn)行系統(tǒng)的分析;聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者SLC17A8基因表型與基因型的臨床意義研究則是通過(guò)對(duì)聽(tīng)神經(jīng)病

5、譜系障礙人群進(jìn)行SLC17A8基因篩查,進(jìn)行該基因的遺傳學(xué)及相關(guān)聽(tīng)神經(jīng)病的臨床特點(diǎn)研究。臨床表型分析和遺傳學(xué)研究相結(jié)合,多方面多層次探討聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙的致病因素、病變部位、病理機(jī)制并為進(jìn)一步的預(yù)防和治療提供指導(dǎo)意義。
　　第一部分聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者臨床特征研究
　　一、中國(guó)人群聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙發(fā)病危險(xiǎn)因素的臨床調(diào)查與分析
　　本研究納入2003年—2013年我院確診的328例聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者,患者男女比例1.0

6、5:1,來(lái)自河北省、山西省、河南省等28個(gè)中國(guó)省市,涉及5個(gè)民族。通過(guò)病史采集、臨床聽(tīng)力學(xué)檢測(cè)、全身及?？撇轶w、相關(guān)影像學(xué)檢查及輔助檢查,調(diào)查328例聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者發(fā)病的危險(xiǎn)因素及疾病的臨床表現(xiàn),分析中國(guó)人群聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者發(fā)病危險(xiǎn)因素發(fā)生特點(diǎn)及有危險(xiǎn)因素患者的臨床表型特征,探討了諸多潛在危險(xiǎn)因素在聽(tīng)神經(jīng)病譜系障發(fā)病中的影響和作用機(jī)制。
　　研究發(fā)現(xiàn):328例聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者中,有28例患者發(fā)病前有著明顯的危險(xiǎn)因素作

7、用,占聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者的8.54％(28/328)。研究結(jié)果顯示,不同年齡發(fā)病的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙人群中,誘發(fā)耳聾發(fā)生的危險(xiǎn)因素種類及發(fā)生率有著顯著差異。本研究的嬰幼兒聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者中,新生兒高膽紅素血癥作為最常見(jiàn)的首要高危因素,占嬰幼兒有危險(xiǎn)因素病例的68.75%(11/16),圍產(chǎn)期缺氧所占的比例則僅次于高膽紅素血癥,占43.75%(7/16)。而在非嬰幼兒期發(fā)病的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者中,感染和耳毒性藥物的使用則在發(fā)病危險(xiǎn)因

8、素中占據(jù)重要地位,分別占有非嬰幼兒期有危險(xiǎn)因素病例的75%(9/12)和83.33%(10/12)。此外,免疫性疾病、噪聲等作為罕見(jiàn)聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙發(fā)病的危險(xiǎn)因素也在本研究中被發(fā)現(xiàn)。
　　本研究還對(duì)一些發(fā)病前有著明顯的危險(xiǎn)因素作用的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙典型病例進(jìn)行了詳細(xì)的調(diào)查和研究,并報(bào)道了不同危險(xiǎn)因素病例各自的臨床特點(diǎn)和聽(tīng)力學(xué)表型特征。
　　二、聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙伴發(fā)耳鳴的臨床研究
　　本研究納入2003年一2013年我院

9、確診的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者,選擇其中本人可準(zhǔn)確陳述病史的患者225例,就診年齡3-45歲,男女比例1:0.71。對(duì)聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者進(jìn)行病史采集及純音測(cè)聽(tīng)、聲導(dǎo)抗、聽(tīng)性腦干反應(yīng)、畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射、言語(yǔ)識(shí)別率、耳蝸電圖等聽(tīng)力學(xué)檢測(cè),并對(duì)耳鳴發(fā)生情況及特點(diǎn)進(jìn)行調(diào)查。分析聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者耳鳴發(fā)生的臨床特征,并為進(jìn)一步探討聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者耳鳴的發(fā)生機(jī)理提供臨床資料。
　　研究發(fā)現(xiàn):聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者耳鳴發(fā)生與聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙發(fā)

10、病年齡、病程、聽(tīng)力損失程度及類型均有一定的相關(guān)性,而與性別無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。225例聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者顯示出較高的耳鳴發(fā)生率,其中56%(126/225)的研究對(duì)象自述伴有耳鳴的癥狀。參與本研究的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者性別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,男性和女性患者耳鳴發(fā)生率分別為52.48%和58.87%,差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者耳鳴發(fā)生有著其特有的臨床特點(diǎn),主要表現(xiàn)為耳鳴發(fā)生好發(fā)于青少年期及青年期發(fā)病的患者,其發(fā)生率分別為63

11、.03%和66.67%。同時(shí),耳鳴發(fā)生率隨病程增長(zhǎng)而增高,病程10年以上的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者耳鳴發(fā)生率可高達(dá)82.14%,明顯高于短病程的患者。在本研究中,綜合征型聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者的耳鳴發(fā)生率較非綜合征性聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者有著及其顯著的增加(84.00%>42.00%)。研究還發(fā)現(xiàn),輕中度低頻下降為主型聽(tīng)力損失的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者耳鳴發(fā)生率明顯高于其他聽(tīng)力損失類型。
　　三、伴發(fā)周?chē)窠?jīng)病的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙家系的臨床研究

12、
　　本研究納入2003年—2012年我院確診的伴發(fā)周?chē)窠?jīng)病的3個(gè)綜合征型聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙家系,家系患者進(jìn)行病史采集、?？企w檢、聽(tīng)力學(xué)檢查及相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)檢查,從患者的臨床表型、聽(tīng)力學(xué)檢測(cè)、家系譜圖及家系遺傳學(xué)特征進(jìn)行分析,并為下一步鑒定致病基因提供臨床資料。
　　研究發(fā)現(xiàn):3個(gè)綜合征型聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙家系均以聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙為首發(fā),包括伴有Charcot-Marie-Tooth(CMT)綜合征的家系2例,伴有運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病

13、的家系1例。3個(gè)家系患者發(fā)病年齡11~22歲,平均15歲,均為語(yǔ)后感音神經(jīng)性耳聾,言語(yǔ)發(fā)育狀況尚可,以典型聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙癥狀為首發(fā),伴周?chē)窠?jīng)病表現(xiàn),如共濟(jì)失調(diào)、感覺(jué)運(yùn)動(dòng)障礙、視力下降等其他系統(tǒng)癥狀。家系譜分析顯示兩個(gè)伴發(fā)CMT綜合征家系分別具有常染色體隱性及X連鎖隱性遺傳特征,而伴發(fā)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病家系則表現(xiàn)出常染色體隱性遺傳的特征。
　　本研究報(bào)道了部分伴發(fā)周?chē)窠?jīng)病、具有特殊臨床表型的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙家系。所報(bào)道的3個(gè)家系發(fā)病

14、年齡及臨床表現(xiàn)具有相似之處,同時(shí)又顯示出各自的特點(diǎn)。本研究的家系中,脫髓鞘病變可能是聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙和周?chē)窠?jīng)病的共同病理機(jī)制。
　　第二部分聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者SLC17A8基因表型與基因型的臨床意義研究
　　本研究納入2003年—2012年我院確診并接受血樣采集的聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者100例,包括96例散發(fā)病例以及4例家系患者?；颊吣信壤?:1.70,就診年齡0.5~36歲,來(lái)自河北省、山西省、河南省等全國(guó)18個(gè)省市。

15、針對(duì)SLC17A8基因的12個(gè)外顯子設(shè)計(jì)19對(duì)引物,對(duì)選取的100例聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者,以及作為對(duì)照的100例聽(tīng)力正常的健康志愿者進(jìn)行SLC17A8基因篩查,采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase chain reaction,PCR)進(jìn)行目的片段擴(kuò)增,并對(duì)PCR產(chǎn)物直接測(cè)序,檢測(cè)基因SLC17A8的突變。同時(shí)對(duì)患者進(jìn)行病史采集、聽(tīng)力學(xué)檢測(cè)及其他相關(guān)檢查,從聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者SLC17A8基因表型與基因型兩方面進(jìn)行系統(tǒng)研究,進(jìn)行遺

16、傳學(xué)和臨床特點(diǎn)分析,以明確SLC17A8基因與聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙的關(guān)聯(lián)。
　　研究發(fā)現(xiàn):在100例聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者中,發(fā)現(xiàn)了SLC17A8基因的26處變異,其中位于外顯子區(qū)域的變異12處,包括國(guó)際上尚未被報(bào)道且導(dǎo)致編碼氨基酸改變的新突變1處、已知單核苷酸多態(tài)3處,以及位于3’端或5’端外顯子非編碼區(qū)的變異8處(6處為本研究首次報(bào)道);另有位于內(nèi)含子區(qū)域的變異14處(4處為本研究首次報(bào)道),其中5處同時(shí)有雜合和純合兩種突變形式,9

17、處僅表現(xiàn)為雜合突變。
　　本研究在1例女性聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙患者中檢測(cè)到了1處可導(dǎo)致編碼氨基酸改變的新突變c.824C>A,該突變?yōu)槲挥赟LC17A8基因第7外顯子的雜合錯(cuò)義突變,導(dǎo)致了SLC17A8基因所編碼的囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白(VGLUT3)第275位的丙氨酸被天冬氨酸所替代。該突變?cè)?00例聽(tīng)力正常的健康志愿者中均未被發(fā)現(xiàn)。SLC17A8基因的c.824C>A突變位于不同物種間高度保守的VGLUT3囊泡內(nèi)環(huán)狀結(jié)構(gòu)區(qū),氨基酸的