膜聯(lián)蛋白Ⅱ的表達與前列腺癌臨床病理特征及進展的關(guān)系研究.pdf

1、第一章膜聯(lián)蛋白Ⅱ的表達與前列腺癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系
　　 目的:研究膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達與前列腺癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，并探討膜聯(lián)蛋白Ⅱ在前列腺癌發(fā)生中的作用。
　　 方法:采用免疫組織化學(xué)方法檢測膜聯(lián)蛋白Ⅱ在40例前列腺增生癥(BPH)和85例前列腺癌標本中的表達情況。統(tǒng)計分析膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達與前列腺癌臨床病理特征的關(guān)系;統(tǒng)計分析膜聯(lián)蛋白Ⅱ與前列腺癌生存時間的關(guān)系，COX風(fēng)險回歸模型分析前列腺癌的獨立的預(yù)后因子。

2、r>　　 結(jié)果:(1)免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:在前列腺癌中膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達陽性率是62.4％(53/85)，在良性前列腺增生癥中陽性率是92.5％(37/40)，兩者差異有顯著性意義(P＜0.05)。
　　 (2)在Gleason評分為2～4、5～7、8～10的前列腺癌中，膜聯(lián)蛋白Ⅱ的陽性率分別是77.5％(31/40)、58.3％(21/36)、11.1％(1/9)，隨著Gleason評分的增加而降低，三者之間表達有顯著性差異(

3、P＜0.05)。
　　 (3)在前列腺特異性抗原(PSA)水平為＜10ng/ml、10～20 ng/ml、＞20 ng/ml的前列腺癌中，膜聯(lián)蛋白Ⅱ陽性率中分別是78.3％(36/46)、57.1％(16/28)、9.1％(1/11)，三者之間表達有顯著性差異(P＜0.05)，膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達與PSA水平呈負相關(guān)。
　　 (4)在低、中、高危前列腺癌中，膜聯(lián)蛋白Ⅱ陽性率分別是80.9％(38/47)、54.2％(13/24

4、)、14.3％(2/14)，隨著前列腺癌危險因素的增加而降低，三者之間表達有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 (5)膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達水平還與臨床分期、前列腺癌復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)和遠處轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)。
　　 (6) Kaplan-Meier生存曲線分析發(fā)現(xiàn):膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達陰性或弱陽性前列腺癌患者的生存率顯著低于膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達陽性和強陽性者(P＜0.01)。
　　 (7)預(yù)后分析發(fā)現(xiàn):前列腺癌在突破包膜（臨床分期

5、T3-T4）、Gleason評分高于7分、PSA＞20ng/mL、有淋巴結(jié)和遠處轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移時，膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達陰性或弱陽性，均預(yù)示著前列腺癌預(yù)后較差，可作為前列腺癌預(yù)后判斷的獨立性指標(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:(1)膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達與前列腺癌的發(fā)生有關(guān)，可作為前列腺癌早期診斷的分子標記物。
　　 (2)膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達水平與Gleason評分，PSA水平、危險性、臨床分期、復(fù)發(fā)、淋巴結(jié)和遠處轉(zhuǎn)移有關(guān)。
　　 (3)

6、膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達下調(diào)，前列腺癌生存率下降，預(yù)后較差，可作為前列腺癌生存分析和預(yù)后判斷的獨立因子。
　　 第二章膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達下調(diào)在前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用
　　 目的:研究膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達下調(diào)與前列腺癌侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，初步探討膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達下調(diào)在前列腺癌侵襲、轉(zhuǎn)移中的作用機制。
　　 方法:采用western blot檢測不同轉(zhuǎn)移潛能的前列腺癌LNCaP（低轉(zhuǎn)移潛能）、PC-3（低轉(zhuǎn)移潛能）、C4-2B（高轉(zhuǎn)移潛能

7、）細胞中膜聯(lián)蛋白Ⅱ的表達情況，分析其表達水平與前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系;采用siRNA技術(shù)干擾前列腺癌PC-3細胞中膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達后，MTT檢測細胞增殖，流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡，Western blot檢測MMP-2、MMP-9表達水平的改變，Transwell小室實驗檢測前列腺癌PC-3細胞體外侵襲能力變化，劃痕試驗檢測前列腺癌PC-3細胞的體外遷移能力變化。
　　 結(jié)果:(1)在高轉(zhuǎn)移潛能前列腺癌細胞中，膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達低

8、于低轉(zhuǎn)移潛能前列腺癌細胞，具有顯著性差異(P＜0.01)。
　　 (2) siRNA技術(shù)干擾膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達后，PC-3-ANXA2-siRNA生長速度增加，與PC-3、PC-3-Lip、PC-3-empty vector相比，有顯著性差異(p＜0.05)，膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達下調(diào)能促進前列腺癌細胞生長。
　　 (3) siRNA技術(shù)干擾膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達后，流式細胞儀檢測PC-3、PC-3-Lip、PC-3-empty vecto

9、r、PC-3-ANXA2-siRNA細胞的凋亡率(％)分別為2.3±1.98、2.1±2.01、2.0±1.81、6.2±2.59，其中PC-3-ANXA2-siRNA凋亡率稍高，但與其它三組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 (4) siRNA技術(shù)干擾膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達后，Western blot檢測到PC-3-ANXA2-siRNA細胞的膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達水平明顯降低，而MMP-2、MMP-9表達水平上調(diào)。
　　

10、 (5) siRNA技術(shù)干擾膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達后，Transwell小室實驗檢測前列腺癌PC-3-ANXA2-siRNA細胞體外侵襲能力增強。
　　 (6) siRNA技術(shù)干擾膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達后，劃痕實驗發(fā)現(xiàn)PC-3-ANXA2-siRNA細胞體外遷移能力增強。
　　 結(jié)論:(1)膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達下調(diào)能促進前列腺癌細胞的生長，膜聯(lián)蛋白Ⅱ是前列腺癌的生長抑制物。
　　 (2)膜聯(lián)蛋白Ⅱ表達水平與前列腺癌侵襲、轉(zhuǎn)移能力有關(guān)，