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文檔簡介
1、光酶誘導能影響生物合成途徑,從而使次生代謝產物發(fā)生變化,特別是能顯著提高植物體內抗毒素(黃酮、木脂素等)的含量,并能生物合成新的高生物活性化合物。應用紫外輻射研究農作物抗毒素開展較多,但將光酶誘導應用于提高中藥活性成分研究未見報道。通過本課題的研究,為合理利用藥材資源、提高藥材質量提供新的技術手段,并從蛋白質水平揭示光酶誘導對活性成分生物合成影響的分子機制。
本論文運用HPLC-DAD及2D-Electrophoresis
2、等技術,主要對光酶誘導桑葉的合適條件進行了篩選,分離并鑒定了桑葉誘導后的次生代謝產物,并對光酶誘導前后桑葉的差異蛋白質組進行了研究。具體內容包括:
1、運用HPLC-DAD方法檢測光酶誘導后的桑葉提取物,共檢測到5個顯著變化的特征色譜峰。通過單因素考察,以5個色譜峰的峰面積為指標,篩選得到了光酶誘導桑葉的最佳條件為:8月的新鮮采摘桑葉,UV-B照射60分鐘;
2、用篩選得到的光酶誘導條件對大量桑葉進行誘導;并
3、對5個特征色譜峰進行靶向追蹤分離,最終共分離得到其中3個化合物,并對其中的兩個進行了結構鑒定,其化學結構為Chalcomoracin和Moracin N;且Chalcomoracin為Diels-Alder加合物;
3、運用2D-Electrophoresis方法對光酶誘導前后桑葉的差異蛋白質組進行研究,通過Progenesis SameSpots軟件處理,得到61個差異點,通過MALDI-TOF-MS分析鑒定了其中的26
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