不同劑量百草枯中毒致小鼠肝、肺、腎損傷特點研究.pdf

1、目的：百草枯(paraquat，PQ)，是目前世界范圍內(nèi)使用最廣泛的除草劑。近年來，我國應(yīng)用PQ日漸增多，中毒的報道呈不斷上升趨勢。雖然PQ對除草非常有效，但它對人和動物的毒性很高。且目前對其發(fā)病機制尚未完全闡明，有效的治療措施不多，更無特效解毒劑。臨床觀察所見，較大劑量中毒患者常由于心、肝、腎、肺等多臟器功能衰竭迅速致死，而較小劑量的中毒活存者往往引起遲發(fā)性肺纖維化，病程相對較長。查閱國內(nèi)外文獻，目前尚無較為全面探索不同劑量PQ中毒與

2、重要臟器損傷之間關(guān)系的實驗，為此我們設(shè)計了從病理學(xué)改變、酶學(xué)指標(biāo)、血生化檢驗等方面來對PQ中毒引起的重要器官損傷特點進行較系統(tǒng)研究的試驗，以便尋求針對性較強的有效治療藥物。 方法：本實驗主要通過建立動物模型來進行研究。首先用無菌生理鹽水將20％的PQ溶液配置成濃度為5mg/ml的溶液。選取成年雄性昆明小鼠112只，體重25±5g，隨機分為4組(每組28只)：①正常對照組(腹腔注射生理鹽水75mg/kg)，②百草枯注射液小劑量組(

3、腹腔注射百草枯50mg/kg)，③百草枯注射液中劑量組(腹腔注射百草枯75mg/kg)，④百草枯注射液大劑量組(腹腔注射百草枯100mg/kg)。各組動物分別于中毒后6h、1d、3d、7d、14d、28d分批進行抽血檢驗，包括肝功能(ALT、AST)，腎功能(BUN、Cr)，隨后處死動物，每次每組活殺4只。處死動物后解剖，剪取右肺及部分肝組織在液氮中速凍，然后置于-85℃保存，以便利用試劑盒檢測組織勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙

4、二醛(MDA)含量；選取肝臟、腎臟、左肺，常規(guī)HE染色，進行病理組織學(xué)觀察；對小劑量染毒組肺臟除進行常規(guī)HE染色外，并進行膠原、彈力纖維二聯(lián)染色；所有檢測結(jié)果均分別與對照組進行對比分析，并進行多樣本均數(shù)的方差分析。 結(jié)果： 1．小劑量染毒組染毒后出現(xiàn)食欲減退、體重稍減輕、呼吸急促等表現(xiàn)，但于7d左右開始恢復(fù)。中及大劑量染毒組小鼠染毒后有明顯呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等損傷，并且體重下降，小鼠于3-7d死亡較多。

5、 2．病理組織學(xué)觀察，小劑量染毒組小鼠肝及腎組織損害均較中大劑量染毒組輕微，中大劑量染毒組早期即出現(xiàn)肝細胞壞死及腎小管大量蛋白管型；肺組織在小劑量染毒組主要表現(xiàn)為引起后期肺纖維化，而中大劑量染毒組則早期即可見到肺出血水腫且小鼠多在早期即死于多器官功能衰竭。 3．小劑量染毒組肝組織勻漿中SOD活力及MDA含量無明顯變化(P>0.05)，而中大劑量染毒組大部分時間點，變化均顯著(P<0.05或P<0.01)。各組肺組織勻漿中兩項指標(biāo)

6、的監(jiān)測，各時間點均較對照組明顯改變(P<0.05或P<0.01)，且相同時間點，染毒劑量越大，變化越明顯。 4．小劑量染毒組血清中ALT、AST、BUN、Cr值后期增加較明顯(P<0.05)，而早期除BUN在3d有所增加(P<0.05)，其余時間點均無明顯變化(P>0.05)。而中劑量組除6h時轉(zhuǎn)氨酶無明顯升高(P>0.05)，其余時間點各項指標(biāo)升高均顯著(P<0.05或P<0.01)。大劑量染毒組各時間點小鼠血清中ALT、AS

7、T、BUN、Cr均有明顯升高(P<0.05或P<0.01)。 結(jié)論：根據(jù)本實驗結(jié)果可以認為： 1．小劑量染毒組肝、腎組織病理損害較輕，以循環(huán)障礙為主伴細胞輕微腫脹，表現(xiàn)為小動靜脈及毛細血管內(nèi)淤血、血流緩慢及肝雙核細胞增多、腎小管上皮腫脹。而肺組織除有淤血外，其主要改變是引起肺纖維化，主要表現(xiàn)在后期肺纖維組織增生，局部出現(xiàn)纖維化傾向。中及大劑量染毒組小鼠早期即出現(xiàn)肝細胞水樣變性，點狀壞死，肺出血、水腫以及腎小管內(nèi)可見較多的

8、蛋白、上皮管型。 2．小劑量染毒組肝組織勻漿中SOD活力降低及MDA含量增加均不明顯，表明其過氧化損傷較輕，而肺組織SOD活力降低及MDA含量增加明顯，其脂質(zhì)過氧化損害重。中及大劑量染毒組肝及肺組織SOD活力降低及MDA含量增加均有明顯改變，脂質(zhì)過氧化損傷嚴重。 3．小劑量染毒組血清中ALT、AST值前期無顯著變化，后期有所升高，BUN值在染毒后第三天有明顯升高，Cr在28d時有所升高，表明在小劑量染毒組伴隨著肺組織功能