星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)選制備載MMP-1的PLGA-PCL納米粒子.pdf

1、目的：基質(zhì)金屬蛋白酶-1（Matrix Metalloproteinase-1，MMP-1）在傷口愈合過程及某些難愈合潰瘍發(fā)生中的重要作用已經(jīng)得到明確，但MMP-1存在半衰期短，穩(wěn)定性差，易被系統(tǒng)清除等缺點(diǎn)，限制了其進(jìn)一步研究和應(yīng)用。本課題擬采用納米技術(shù)以高分子聚合材料為載體，通過雙乳化溶劑蒸發(fā)技術(shù)將MMP-1包封在納米粒子中，為進(jìn)一步研究應(yīng)用打下基礎(chǔ)，以期延長(zhǎng)MMP-1的體內(nèi)緩釋時(shí)間，提高M(jìn)MP-1穩(wěn)定性。
　　方法：首先通過單

2、因素實(shí)驗(yàn)分析，初步確定影響納米粒子制備的三個(gè)主要影響因素：乳化時(shí)間，乳化轉(zhuǎn)速，有機(jī)相與外水相的體積比；在此基礎(chǔ)上，研究采用模型預(yù)測(cè)精度較高的星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面的方法分析三個(gè)主要影響因素對(duì)納米粒子粒徑、包封率的影響，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多元非線性回歸和二項(xiàng)式擬合，根據(jù)指標(biāo)與三個(gè)影響因素的三維效應(yīng)面和二維等高圖篩選出最佳處方，并進(jìn)行預(yù)測(cè)分析。根據(jù)最優(yōu)化配方制備載MMP-1的納米粒子，并評(píng)價(jià)納米粒子特性、MMP-1的體外緩釋情況、制備過程有無(wú)對(duì)MM

3、P-1酶解活性產(chǎn)生影響。
　　結(jié)果：星點(diǎn)設(shè)計(jì)多元非線性回歸和二項(xiàng)式擬合相關(guān)系數(shù)較高，R>0.96，研究?jī)?yōu)選出的載MMP-1納米粒子的最優(yōu)處方：時(shí)間7min，轉(zhuǎn)速4.5krpm，有機(jī)相與外水相體積比0.4。在此最佳制備條件下制備納米粒子，所得蛋白包封率為(38.75±4.74)％，平均粒徑為322.7±18.1 nm。處方優(yōu)化結(jié)果驗(yàn)證表明，實(shí)際值與預(yù)測(cè)值之間的偏差較小，分別為：粒徑偏差4.4%，包封率偏差1.0%，實(shí)際值與預(yù)測(cè)值基本

4、吻合，二次多項(xiàng)式回歸擬合有較好的預(yù)測(cè)作用。掃描電子顯微鏡顯示納米粒子為球形，表面光滑，平均粒徑在300nm。MMP-1體外緩釋可達(dá)60天，并且制備過程仍然保留了MMP-1的酶解活性。
　　結(jié)論:1、本研究采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)—效應(yīng)面優(yōu)化法能夠準(zhǔn)確反映載MMP-1納米粒子制備過程中三個(gè)關(guān)鍵影響因素對(duì)粒子粒徑與包封率的影響，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行多元非線性和二項(xiàng)式擬和，對(duì)最優(yōu)擬和方程用三維效應(yīng)面和二維等高線圖篩選出最佳制備配方。
　　2、納米粒子