芹菜素在急性缺血性大鼠腦損傷的作用及其意義.pdf

1、目的：1．研究芹菜素對(duì)鐵依賴(lài)性脂質(zhì)過(guò)氧化(IDLPO)的抑制作用； 2．建立急性缺血再灌注大鼠腦損傷模型，研究芹菜素在急性缺血性大鼠腦損傷中的抗炎性作用及意義。 方法：1. 體外實(shí)驗(yàn)用200μmol幾硫酸亞鐵激發(fā)大鼠腦勻漿形成脂質(zhì)過(guò)氧化，加入37、18．5、1．85μmol/L三個(gè)濃度的芹菜素和去鐵胺，分別反應(yīng)0．5小時(shí)、1小時(shí)和4小時(shí)，用TBA比色法測(cè)脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量。數(shù)據(jù)分析用SPSS11．5軟件進(jìn)

2、行處理，采用單因素方差分析。 2．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用線栓法誘發(fā)急性缺血再灌注大鼠腦損傷模型，動(dòng)物分為五組：假手術(shù)組(S，n=11)；半小時(shí)模型組(M0．5h，n=11)：4小時(shí)模型組(M4h，n=11)；半小時(shí)芹菜素組(Ao5h，n=11)；4小時(shí)芹菜素組(A4h，n=11)。芹菜素組于造模前24小時(shí)和再灌注時(shí)腹腔注射11．6×10-3M芹菜素溶液25mg/kg(0．8ml／100g)各一次。假手術(shù)組和模型組在相同的時(shí)間注射等體積生理

3、鹽水。各組動(dòng)物麻醉清醒后均給予神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，觀察至規(guī)定時(shí)間點(diǎn)頸椎脫臼法處死。取腦組織分別測(cè)定腦含水量(WC)、伊文思藍(lán)(EB)含量、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活力和光鏡、電鏡及腦組織切片TTC染色。數(shù)據(jù)分析用SPSSll．5軟件進(jìn)行處理，采用秩和檢驗(yàn)和單因素方差分析及直線相關(guān)分析。 結(jié)果： 1. 體外實(shí)驗(yàn)在37、18．5、1．85岬ol幾三個(gè)濃度的芹菜素作用下大鼠

4、腦勻漿的MDA值均有下降(P<0．01)；與去鐵胺組比較無(wú)顯著性差異(P>0．05)；且芹菜素和去鐵胺各濃度組、各時(shí)間組間均無(wú)明顯差異(P>0．05)。2．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)(1)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分：S組為0；M組為2．13±O．50；A組為1．8l±O．40。M組、A組與S組比較差異均有高度顯著性(P<0．01)，A組與M組之間無(wú)顯著性差異(P>0．05)。(2)腦組織TTC染色：S組腦片均紅染，無(wú)白色梗死灶形成；M0.5h組出現(xiàn)白色梗死灶，位于顳

5、頂葉皮層和尾殼核；M4h組的梗死灶范圍明顯大于M0.5h組，可見(jiàn)較大的尾殼核和額顳頂葉皮層梗死灶的融合；A組的梗死灶范圍較相應(yīng)時(shí)間的M組均有不同程度的縮小，主要表現(xiàn)在皮層。(3)大鼠腦皮層與海馬結(jié)構(gòu)變化：M4h海馬cAl區(qū)和缺血區(qū)皮層的膠質(zhì)細(xì)胞明顯腫脹，毛細(xì)血管周?chē)[明顯，較多水腫的神經(jīng)元突起，同時(shí)見(jiàn)有神經(jīng)元核固縮、局灶性輕微水腫及神經(jīng)元粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張等；M0.5h組和A組腦病理改變不顯著。(4)腦含水量(％)：S組：78．93±0．

6、58；Mo．5h組：81．89±1．16；M4h組：82．75±1．10；A0.5h組：80．19±O．53；A4h組：80．76±O．41。M組與A組的腦含水量均明顯高于s組，差異有高度顯著性(O．5h和4h組，PO．05)。(5)腦EB含量(μg/g)：S組：5

7、．59±0．83；Mo．5h組：6．57±0．94；M4h組：11．96±1．39；A0．5h組：5．86±O．75；A4h組：10．27±1．23。M4h組與A4h組的腦組織EB含量明顯高于S組，差異有高度顯著性(P0．05)；Ao．5h組與M0.5h組無(wú)顯著性差異(P>0．05)；A4h組明顯低于M4h組，差異有高度顯著性(P<0．01)；M組與A組的4h組均較O．5

8、h組明顯增高，差異有高度顯著性(P

9、異(P>O．05)：A組明顯低于相應(yīng)時(shí)間的M組，差異有高度顯著性(PO．05)。(7)IL-1β(ng/g)：S組：5，13±0．90；Mo．5h組：5．72±0．54；M4h組：9．45±1．16；A05h組：5．54±0．74；A4h組：6．32±O．68。M4h組與A4h組的腦組織IL-1β明顯高于S組，差異有高度顯著性(P<0．01)；M0.5h組、Ao：5h組與S組比較無(wú)顯

10、著性差異(P>0．05)：A0．5h組與M0．5h組無(wú)顯著性差異(P>0．05)；A4h組明顯低于M4h組，差異有高度顯著性(P<0．01)；M4h組較Mo5h組增高，差異有高度顯著性(PO．05)。(8)iNOS活力(U/mg)：S組：5．62±0．95；Mo．5h組：6．44±O．68：M4h組：13．76±2．50；A0．5h組：5．43±0．63；A4h組：lO．17±2．7

11、1。M4h組與A4h組的腦組織iNOS活力明顯高于S組，差異有高度顯著性(P<0．01)；Mo5h組、A0．5h組與S組無(wú)顯著性差異(P>0．05)；Ao．5h組與Mo．5h組無(wú)顯著性差異(P>O．05)；A4h組明顯低于M4h組，差異有高度顯著性(P

12、F-α、IL-1β、iNOS活力均呈正相關(guān)(分別是r=0．9.11，r=O．778，r=0．7n，P<0．01)；腦EB含量與腦組織的TNF-α、IL-1β、iNOS活力均呈正相關(guān)(r=O．688，r=O．855，r=0．931，P