Aβ寡聚體選擇性單抗對阿爾茨海默病雙轉(zhuǎn)基因小鼠治療效果的研究.pdf

1、阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一種與衰老相關(guān)、以認(rèn)知障礙為主要臨床表現(xiàn)的神經(jīng)退行性疾病。目前公認(rèn)Aβ寡聚體是AD早期神經(jīng)元損傷及病理改變的主要致病物質(zhì)。本研究旨在前期工作基礎(chǔ)上，探討Aβ寡聚體選擇性單抗A8對AD雙轉(zhuǎn)基因模型小鼠的早期治療效果和機(jī)制。
　　選擇4月齡APPswe/PS1△E9雙轉(zhuǎn)基因小鼠，腹腔注射 A8單抗。8周后，通過Morris水迷宮實驗(包括定位航行和空間探索實驗)分析轉(zhuǎn)基因小

2、鼠學(xué)習(xí)記憶行為學(xué)的改善情況；以RIPA裂解液制備腦組織勻漿；采用Western blot檢測小鼠腦內(nèi)Aβ42寡聚體、總Aβ、Aβ-42、Aβ1-40以及磷酸化tau蛋白(p-tau)水平；腦組織超薄切片，在透射電鏡下觀察海馬超微病理改變。利用前期獲得的輕重鏈可變區(qū)基因，構(gòu)建A8的人-鼠嵌合抗體表達(dá)載體，dhFr營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定的細(xì)胞株并初步鑒定。
　　結(jié)果表明在水迷宮定位航行實驗中，A8組和野生組潛伏期逐漸縮短，在第4 d時

3、與對照組相(包括模型組和IgG組)比有統(tǒng)計學(xué)差異(p<0.05)?？臻g探索實驗A8組小鼠潛伏期明顯縮短(p<0.05)；Western blot結(jié)果表明，A8治療后與對照組相比，在樣品上清與沉淀中檢測到腦內(nèi)Aβ寡聚體(p<0.01)、總Aβ(p<0.01，)、Aβ1-42(p<0.05)以及磷酸化(Thr231)tau蛋白水平(p<0.01)明顯降低，但是Aβ1-40蛋白水平?jīng)]有明顯變化(p>0.05)。透射電鏡結(jié)果表明，A8組小鼠海馬