黃芪注射液對內(nèi)皮細胞增殖及分泌粘附分子VCAM-1和E-selectin的研究.pdf

1、目的 了解黃芪注射液對內(nèi)皮細胞增殖及分泌粘附分子VCAM-1和E-selectin的影響，探討黃芪注射液對造血調(diào)控的機理。 方法 (1)．建立人臍靜脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)模型，用免疫細胞化學方法及電子顯微鏡技術鑒定內(nèi)皮細胞；(2)．將HUVEC與黃芪注射液不同劑量(0μg/mL、4μg/mL、40μg/mL、400μg/mL和4000μg/mL)一起培養(yǎng)，用MTr檢測內(nèi)皮細胞增殖；以流式細胞分析術測定內(nèi)皮細胞增殖周期

2、；以TNF作為陽性對照，用ELISA法對粘附分子VCAM-1和E-selectin進行測定。 結(jié)果 (1)成功的建立了人臍靜脈內(nèi)皮細胞的體外模型；用Ⅷ因子相關抗原免疫細胞化學染色結(jié)果為陽性、電鏡檢測到W-P小體，證實培養(yǎng)細胞為人臍靜脈內(nèi)皮細胞。(2)內(nèi)皮細胞隨著培養(yǎng)時間的延長，各組均顯示出不同程度的促生長效應(Time：P<0.05；Concentration：P<0.05)。(3)細胞周期檢測顯示實驗組內(nèi)皮細胞周期各時

3、相的細胞數(shù)占細胞總數(shù)的百分比與黃芪組比較有明顯的不同(P<0.05)。S期和G<,2>/M期細胞顯著增多(P<0.05)，而G<,0>/G<,1>期細胞相對比例減少(P<0.05)。(4)體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞可自然分泌VCAM-1。各個濃度的黃芪注射液與TNF一樣均具有促進內(nèi)皮細胞分泌VCAM-1的作用，其中400μg/mL的黃芪注射液濃度是促進內(nèi)皮細胞分泌VCAM-1的最佳濃度(P<0.05)，而且黃芪注射液具有協(xié)同tNF的作用(P<0

4、.05)。(5)內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)在沒有任何刺激的情況下未檢測到E-selectin。黃芪注射液刺激內(nèi)皮細胞也未檢測到E-selectin。內(nèi)皮細胞在TNF刺激活化后表達E-seleetin。黃芪注射液能促進TNF活化的內(nèi)皮細胞分泌E-se-lectin(P<0.05)。 結(jié)論 本研究提示，黃芪的補氣生血途徑之一可能是通過直接刺激內(nèi)皮細胞增殖和分泌造血生長因子和粘附分子，從而間接發(fā)揮造血調(diào)控作用的；黃芪可能促進造血干祖細胞