急性冠脈綜合征患者糖基化氧化過程改變及對血管內(nèi)皮功能的影響.pdf

1、本研究分為四部分：
　　 第一部分：糖化白蛋白對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增生及MCP-1表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的:觀察糖化人白蛋白(GHA)對培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)的增殖過程和表達(dá)單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)影響及氟伐他汀(Fluvastatin)干預(yù)作用。
　　 方法:1、運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)方法,用倒置顯微鏡觀察GHA干預(yù)下HUVECs的增值過程。2、四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT法)檢測H

2、UVECs增殖情況。3、酶聯(lián)免疫吸附法檢測HUVECs上清液MCP-1含量。4、氟伐他汀干預(yù)GHA誘導(dǎo)的HUVECs增殖情況和MCP-1含量。
　　 結(jié)果:1、GHA以濃度依賴方式抑制HUVECs增殖(P<0.05)。2、GHA以時(shí)間依賴方式抑制HUVECs增殖(P<0.05)。3、HUVECs的MCP-1表達(dá)隨著GHA濃度增加而增加(P<0.05)。4、HUVECs的MCP-1表達(dá)隨著GHA濃度干預(yù)呈時(shí)間依賴性(P<0.05)

3、。5、氟伐他汀可明顯抑制GHA誘導(dǎo)的HUVECs表達(dá)MCP-1增加(P<0.05)。
　　 結(jié)論:1、GHA抑制HUVECs增殖,提示GHA引起內(nèi)皮細(xì)胞代謝更新異常。2、GHA增加HUVECs的MCP-1表達(dá),提示GHA參與炎癥反應(yīng)。3、氟伐他汀抑制GHA誘導(dǎo)的HUVECs表達(dá)MCP-1增加,提示氟伐他汀有非調(diào)脂抗炎作用。結(jié)果提示GHA可能通過干預(yù)內(nèi)皮細(xì)胞再生和促進(jìn)炎癥反應(yīng)參與動(dòng)脈硬化過程。
　　 第二部分：急性冠脈綜合

4、癥患者糖基化過程改變及相關(guān)性研究
　　 目的:通過檢測急性冠脈綜合癥患者及對照組外周血漿GHA、AGEs、MCP-1水平,探討糖基化過程與急性冠脈綜合征(ACS)發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　 方法：1、入選急性心肌梗死患者(AMI)組76例,不穩(wěn)定心絞痛(UA)組60例,穩(wěn)定性心絞痛(SA)組66例患者。均行冠脈造影進(jìn)行證實(shí)。無冠心病對照組50例。2、使用硝基四氮唑蘭顯色法(NBT法)分別測定3組患者和對照組血中GHA水平的變

5、化。3、使用熒光分光光度法分別測定3組患者和對照組血中AGEs水平的變化。4、使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)分別測定3組患者和對照組血中MCP-1水平的變化。5、分析GHA水平及變化相關(guān)性。
　　 結(jié)果:1、外周血GHA水平在AMI患者明顯高于對照組(P<0.01)；外周血GHA水平在UA患者明顯高于對照組(P<0.01)；外周血GHA水平在AMI患者明顯高于SA組(P<0.01)；外周血GHA水平在UA患者明顯高于SA組(

6、P<0.01)。2、冠心病患者冠狀動(dòng)脈二支及三支病變組GHA水平明顯高于單支病變組及正常對照組,(P<0.05)；3、AMI組較對照組AGEs水平明顯升高(P<0.05),UA組較對照組AGEs水平明顯升高(P<0.05)。4、各組內(nèi)2型DM與非DM患者AGEs濃度比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。5、AMI組MCP-1水平明顯高于對照組(P<0.01),UA組MCP-1水平明顯高于對照組(P<0.01),AMI組MCP-1水平明顯高于

7、SA組(P<0.01),UA組MCP-1水平明顯高于SA組(P<0.05)。6、相關(guān)性分析顯示,ACS患者外周血GHA水平與MCP-1有較好的相關(guān)性(r=0.721,P<0.01)。
　　 結(jié)論:1、ACS患者AMI組和UA組外周血GHA水平明顯升高。ACS患者AMI組和UA組外周血AGEs水平明顯升高。提示ACS患者體內(nèi)糖基化過程處于較高水平。2、ACS患者體內(nèi)糖基化升高與MCP-1相關(guān),提示糖基化過程可能參與炎癥反應(yīng)。3、外

8、周血GHA的水平與冠狀動(dòng)脈的病變嚴(yán)重程度有關(guān),GHA可能促進(jìn)動(dòng)脈硬化發(fā)生和發(fā)展。
　　 第三部分：急性冠脈綜合征氧化應(yīng)激過程變化及與糖基化程度相關(guān)性研究
　　 目的：通過檢測急性冠脈綜合征(ACS)患者體內(nèi)晚期蛋白氧化產(chǎn)物(AOPP)、丙二醛(MDA)的水平,探討氧化應(yīng)激損傷與急性冠脈綜合征發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　 方法：1、入選急性心肌梗死(AMI)組76例,不穩(wěn)定心絞痛(UA)組60例,穩(wěn)定性心絞痛(SA)組6

9、6例患者。均行冠脈造影進(jìn)行證實(shí)。無冠心病對照組50例。分別采集外周靜脈血標(biāo)本。2、在紫外熒光340nm及酸性條件下測定血清標(biāo)本的吸光度,并以相應(yīng)氯胺T濃度(umol/L)來表示AOPP濃度。3、用硫代巴比妥酸法(TBA法)測定血清標(biāo)本的MDA濃度。4、AOPP與GHA和AGEs進(jìn)行相關(guān)分析。
　　 結(jié)果:1、AMI組AOPP濃度與對照組比較顯著升高(P<0.05),AMI組AOPP濃度與SA組比較顯著升高(P<0.05),UA組

10、AOPP濃度與對照組比較顯著升高(P<0.05),UA組AOPP濃度與SA組比較顯著升高(P<0.05)。2、AMI組及UA組AOPP濃度與AGEs呈正相關(guān)(P<0.01)。3、AMI組及UA組AOPP濃度與GHA水平呈正相關(guān)(P<0.01)。4、AMI組MDA濃度較對照組明顯升高(P<0.05),UA組MDA.濃度較對照組升高無顯著性(P>0.05)。
　　 結(jié)論:1、ACS患者血清AOPP、MDA濃度顯著升高,提示氧化應(yīng)激參

11、與ACS發(fā)生發(fā)展過程。2、ACS患者體內(nèi)AOPP與AGEs及GHA明顯相關(guān),提示糖基化過程中有氧化過程參與并相互作用。
　　 第四部分：急性冠脈綜合癥患者內(nèi)皮功能改變
　　 目的:觀察急性冠脈綜合征(ACS)患者血管內(nèi)皮功能改變及相關(guān)因素。
　　 方法:1、共入選100例冠心病患者,其中穩(wěn)定性心絞痛組(SA)30例,不穩(wěn)定心絞痛組UA(28)例,急性心肌梗死組AMI(42)例,均經(jīng)冠脈造影證實(shí)。無冠心病對照組入選

12、15例。2、測定3組病人及對照組vWF的變化。3、測定3組病人及對照組肱動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性血流介導(dǎo)的舒張(FMD)、非內(nèi)皮依賴性硝酸甘油介導(dǎo)的舒張(TNG-MD)的變化。
　　 結(jié)果:1、AMI組vWF水平較對照組明顯升高(P<0.05),UA組vWF水平較對照組明顯升高(P<0.05),SA組vWF水平較對照組升高但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2、AMI組FMD水平較對照組明顯降低(P<0.05),UA組FMD水平較對照組降低但