基于納米金顆粒與限制性內(nèi)切酶的電化學(xué)生物傳感器研究.pdf

1、納米金顆粒具有易于合成與修飾、穩(wěn)定性好、生物相容性好等特點(diǎn),同時(shí),納米顆粒上往往可以裝載較多的生物分子,從而起到信號(hào)增強(qiáng)的作用,在電化學(xué)生物傳感器研究中備受關(guān)注。限制性內(nèi)切酶具有特異的序列識(shí)別能力及高效的催化活性,通過巧妙的設(shè)計(jì),可輔助目標(biāo)物循環(huán)釋放從而實(shí)現(xiàn)信號(hào)的增強(qiáng),在電化學(xué)生物傳感器中同樣受到了越來越多的關(guān)注。本文基于納米金顆粒與限制性內(nèi)切酶的放大技術(shù),發(fā)展了簡便、靈敏的電化學(xué)生物傳感器。主要研究內(nèi)容如下：
　　 ⑴基于納米

2、金顆粒放大信號(hào)的電化學(xué)傳感器用于三聚氰胺的檢測(cè)。三聚氰胺與胸腺嘧啶(T)之間能夠通過三個(gè)氫鍵結(jié)合,以富T的DNA探針為識(shí)別元件,修飾在電極表面,結(jié)合DNA修飾的納米金顆粒放大技術(shù),以電活性物質(zhì)釕胺作為信號(hào)分子,發(fā)展了一種高靈敏檢測(cè)三聚氰胺的電化學(xué)傳感器,該傳感器具有良好的特異性和靈敏度,檢測(cè)下限低至0.5 nM。
　　 ⑵限制性內(nèi)切酶循環(huán)放大的電化學(xué)傳感器用于DNA的檢測(cè)。限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別DNA雙鏈中的特定序列并進(jìn)行切割,從

3、而改變DNA雜交的穩(wěn)定性。將限制性內(nèi)切酶的切割技術(shù)與表面鄰近雜交反應(yīng)結(jié)合起來,發(fā)展了一種檢測(cè)DNA的高靈敏電化學(xué)傳感器,該傳感器中限制性內(nèi)切酶可以輔助目標(biāo)DNA循環(huán)釋放,使一條目標(biāo)DNA可以進(jìn)行多次信號(hào)的獲取,提高檢測(cè)靈敏度,檢測(cè)下限低至14pM。同時(shí),該方法的特異性較好,可區(qū)分單堿基錯(cuò)配的DNA。
　　 ⑶基于表面連接反應(yīng)與納米金顆粒的電化學(xué)傳感器用于單堿基突變的識(shí)別。DNA連接酶對(duì)單堿基突變的識(shí)別具有很高的特異性。將酶的特異