hsBAFF刺激T淋巴細(xì)胞功能在增強(qiáng)NK細(xì)胞活性中的作用及其機(jī)理研究.pdf

1、本文運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)、流式細(xì)胞分析、放射性免疫分析、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)等免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)技術(shù)，綜合研究和觀察了hsBAFF對(duì)小鼠T淋巴細(xì)胞的免疫功能活性及其分泌細(xì)胞因子的變化，T淋巴細(xì)胞亞群分布和hsBAFF作用于NK細(xì)胞活性影響，探討了hsBAFF刺激T淋巴細(xì)胞在增強(qiáng)NK細(xì)胞活性中的作用及其機(jī)理。結(jié)果如下： 1、hsBAFF對(duì)小鼠脾細(xì)胞中NK細(xì)胞活性影響及其與IL-2和IFN-γ關(guān)系研究 研究hsBAFF對(duì)小鼠脾細(xì)胞中NK細(xì)胞

2、活性影響及其與IL-2和IFN-7關(guān)系。分離的脾細(xì)胞中NK細(xì)胞活性在hsBAFF(0.5，2 and 5 μg/ml)和/或IL-2(5 and 50U/ml)、IFN-γ(20 and 50 ng/ml)處理12和/或24 h后分析。采用Pemoll(R)密度梯度法獲得純的NK細(xì)胞。然后加入hsBAFF和/或IL-2、IFN-γ作用12 h后，檢測(cè)NK細(xì)胞活性。結(jié)果顯示，hsBAFF增強(qiáng)脾細(xì)胞中NK細(xì)胞活性；IL-2和IFN-γ在hs

3、BAFF增強(qiáng)脾細(xì)胞NK細(xì)胞活性中的作用。我們發(fā)現(xiàn)單一hsBAFF沒有引起NK細(xì)胞活性升高，但有或沒有hsBAFF伴隨IL-2或玳F-γ存在情況下NK細(xì)胞活性以劑量依賴方式增強(qiáng)。提示：hsBAFF通過IL-2和/或INF-γ介導(dǎo)NK細(xì)胞活性升高，hsBAFF提高脾細(xì)胞中NK細(xì)胞活性可能與其中含有的T淋巴細(xì)胞反應(yīng)有密切的關(guān)系。 2、hsBAFF通過刺激T淋巴細(xì)胞功能增強(qiáng)NK細(xì)胞活性 分別采用免疫磁珠法和Percoll(R)密

4、度梯度法獲得純的T和B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞。將NK細(xì)胞分別與混合的T、B細(xì)胞，T細(xì)胞或B細(xì)胞(加2.5μg/ml anti-IgM和B細(xì)胞共刺激)共培養(yǎng)，并加入hsBAFF(0.5、2μg/ml)為12和24 h后，檢測(cè)NK細(xì)胞活性。L另將NK細(xì)胞分別與來源于hsBAFF處理12 h的混合T、B細(xì)胞，T細(xì)胞或B細(xì)胞上清液共培養(yǎng)12和24 h后，檢測(cè)NK細(xì)胞活性。采用放射免疫分析和ELISA檢測(cè)培養(yǎng)上清液中IL-2和INF-γ水平。探討hs

5、BAFF通過T、B細(xì)胞對(duì)NK細(xì)胞活性調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明：hsBAFF有效地提高和混合的T、B細(xì)胞或T細(xì)胞共培養(yǎng)的NK細(xì)胞活性，但與B細(xì)胞共培養(yǎng)無作用；hsBAFF處理的混合T、B細(xì)胞或T細(xì)胞培養(yǎng)上清液增強(qiáng)NK細(xì)胞活性，但B細(xì)胞培養(yǎng)上清液無作用；hsBAFF刺激T細(xì)胞產(chǎn)生高水平的IL-2和IFN-γ。提示：hsBAFF增強(qiáng)NK細(xì)胞活性關(guān)聯(lián)著T細(xì)胞對(duì)hsBAFF免疫反應(yīng)，包括它的分泌產(chǎn)物。 3、hsBAFF刺激CD4+細(xì)胞功能增強(qiáng)N

6、K細(xì)胞活性機(jī)理研究 hsBAFF對(duì)脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的影響，探討hsBAFF上調(diào)NK細(xì)胞活性的機(jī)理。選用區(qū)分CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞的雙色抗體，采用流式細(xì)胞儀分析檢測(cè)脾臟CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞亞群分布。結(jié)果顯示：在用hsBAFF(0.5和2 μg/ml)處理12和24h后，CD4+T淋巴細(xì)胞比例隨hsBAFF劑量的升高而增高，其中2μg/ml hsBAFF處理組比對(duì)照組顯著增高，但各組的CD8+T細(xì)胞百分比相近。CD4