基于新一代測序技術(shù)的中藥制劑質(zhì)量評價方法.pdf

1、中藥制劑是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，按照“君臣佐使”的組方原則，選擇適宜韻藥味和劑量，制成隨時可以取用的現(xiàn)成藥品。目前，我國中藥制劑并不被歐美國家所認(rèn)可，主要原因之一在于其質(zhì)量評價體系不完善。建立科學(xué)、合理的中藥制劑質(zhì)量評價體系是實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化、產(chǎn)業(yè)化和國際化的關(guān)鍵之一。中藥制劑傳統(tǒng)質(zhì)量評價方法(顯微鑒別，TLC鑒別和HPLC含量測定等）的局限性在于難以區(qū)分形狀相似的近緣物種及含有相同主要化學(xué)成分的物種，不能檢測制劑中的未知生物成分，這些瓶頸制

2、約著中藥制劑走向國際化。基于新一代高通量測序技術(shù)的元基因組研究方法是目前認(rèn)識、分析生物混合體系結(jié)構(gòu)和功能最有效、最重要的方法之一。本課題選擇六味地黃丸作為研究對象，嘗試將高通量元基因組研究思路與技術(shù)應(yīng)用于中藥制劑研究中，即對中藥制劑的全部生物成分進(jìn)行定性分析，然后結(jié)合傳統(tǒng)HPLC評價方法，以期建立一種全面、準(zhǔn)確、有效的中藥制劑質(zhì)量評價新方法。
　　目的:使用新一代測序技術(shù)以及高效液相色譜指紋圖譜技術(shù)對不同廠家、不同批次的六味地黃丸

3、樣品進(jìn)行質(zhì)量評價。
　　方法:采用新一代測序技術(shù)對六味地黃丸樣品中的處方物種和雜質(zhì)物種進(jìn)行鑒定，以轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)ITS2基因和質(zhì)體trnL基因的p-loop區(qū)作為分子標(biāo)記片段，對9個市售樣品和一個自制樣品進(jìn)行擴(kuò)增和測序，共得到了90，000多條高質(zhì)量的序列。此外，通過HPLC指紋圖譜技術(shù)對不同六味地黃丸樣品的化學(xué)組成進(jìn)行了分析和比較。
　　結(jié)果:基于新一代測序技術(shù)的方法，確定了六味地黃丸中的部分處方物種成分以及雜質(zhì)成分，并發(fā)現(xiàn)不