培哚普利對異丙腎上腺素誘導的大鼠心肌肥厚中FGF-2的影響.pdf

1、背景與目的：
　　心肌肥厚是多種心血管疾病早期的病理改變之一，分為病理性和生理性，病理性心肌肥厚表現(xiàn)為心肌纖維增生，心肌細胞排列紊亂，繼續(xù)發(fā)展可引起心室重構、心力衰竭，并可能導致惡性心律失常、急性心肌梗死或心源性猝死等高危疾病是心血管疾病的獨立危險因素，因此心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展機制一直是心血管方面的研究熱點。
　　成纖維細胞生長因子是一組多肽形成纖維細胞的有絲分裂原，具有促進血管、骨形成和損傷修復的功能，其中FGF-1(fib

2、roblast growth factor-1，F(xiàn)GF-1)和FGF-2(fibroblast growth factor-2，F(xiàn)GF-2)最早被發(fā)現(xiàn)，同時因電泳時等電點分別呈現(xiàn)酸性和堿性又被稱為酸性成纖維細胞生長因子(acidic fibroblast growth factor，aFGF、FGF-1)和堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF、FGF-2)。國外研究示FGF-2與

3、心肌細胞表達的功能性受體(Fibroblast growth factor receptor，F(xiàn)GFR)結合，誘導酪氨酸磷酸化級聯(lián)反應，促進心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展。
　　成纖維細胞生長因子-2(fibroblast growth factor，F(xiàn)GF-2)是成纖維細胞生長因子家族中的一員，國外研究表明FGF-2在慢性腎臟衰竭的心肌肥厚組織中表達明顯升高，提示FGF-2與心肌肥厚病理改變有關。
　　研究證明RAAS系統(tǒng)與心肌肥厚病

4、理改變有關。RAAS系統(tǒng)即腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)，血管緊張素原經(jīng)過腎素的作用可轉化為血管緊張素Ⅰ，而血管緊張素Ⅰ在血管緊張素轉化酶的作用下形成血管緊張素Ⅱ，隨后與血管緊張素受體結合，引起多種生理作用，例如使全身微動脈收縮，醛固酮分泌增加等，從而導致心肌重構等一系列病理改變。血管緊張素轉化酶抑制劑(angiotensin converting enzyme inhibitors，ACEI)類藥物可以阻止血管緊張素Ⅰ向血管緊張素Ⅱ轉化

5、，使血管緊張素Ⅱ生成減少，阻止心肌重構發(fā)生發(fā)展。
　　本研究通過制作異丙腎上腺素性大鼠心肌肥厚模型，了解大鼠心肌肥厚細胞中FGF-2活性變化，探討在心肌肥厚傳導通路中FGF-2的作用及發(fā)生機制，以及培哚普利對FGF-2表達的影響，為以后臨床制定藥物治療方案提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　隨機將30只健康雄性SD大鼠分為對照組、模型組及藥物干預組，每組10只。模型組和藥物干預組大鼠皮下注射異丙腎上腺素(isoproter

6、enol，ISO)3mg/(kg·d)制作心肌肥厚模型，對照組大鼠皮下注射等劑量的蒸餾水。藥物干預組大鼠應用培哚普利1mg/(kg·d)溶于2ml蒸餾水中灌胃，對照組和模型組大鼠應用等劑量生理鹽水灌胃，連續(xù)飼養(yǎng)10d。10天后將3組大鼠分別測量體重、心臟質量及左心室質量，計算心臟及左心室質量指數(shù)，分別取3組大鼠左心室心肌組織行HE染色，觀察左心室心肌形態(tài)及排列，應用免疫組化方法觀察心肌組織中FGF-2的表達，逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-R

7、CR)檢測心肌細胞中FGF-2的mRNA含量。
　　結果：
　　1、心臟質量指數(shù)和左心室質量指數(shù)
　?、傩呐K質量指數(shù)(HM/BM):對照組＜藥物干預組＜模型組，組間比較有統(tǒng)計學意義（1.93±0.11mg/g vs 2.71±0.34mg/g vs 3.79±0.11mg/g，均P＜0.05）。
　?、谧笮氖屹|量指數(shù)(LVM/BM):對照組＜藥物干預組＜模型組，組間比較有統(tǒng)計學意義（1.46±0.11mg/g v

8、s 1.96±0.12mg/g vs 2.49±0.07mg/g，均P＜0.05）。
　　2、蘇木精—伊紅(hematoxylin-eosinstaining，HE)染色
　　對照組心肌細胞排列整齊，結構清楚，未見形態(tài)異常;模型組心肌細胞肥大，且排列不規(guī)則，細胞結構模糊，細胞間質伴有大量心肌纖維增生;藥物干預組心肌細胞的病理改變程度重于對照組，但輕于模型組。
　　3、逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)
　　RT-

9、PCR檢測3組大鼠左心室心肌肥厚組織中FGF-2mRNA含量比較:模型組＞藥物干預組＞對照組，組間比較有統(tǒng)計學意義(0.39±0.07 vs 0.63±0.12vs0.73±0.12，均P＜0.05)。
　　4、免疫組化方法
　　免疫組化染色后FGF-2在心肌細胞中呈棕色顆粒，正常組織中心肌細胞胞漿中可見少量深棕色顆粒，呈微弱陽性表達;模型組中心肌細胞胞漿內可見大量棕色顆粒，呈強陽性表達;干預組中可見棕黃色顆粒，呈陽性表達，

10、較模型組少。組間比較有統(tǒng)計學意義。3組大鼠心肌組織中FGF-2陽性區(qū)平均積分光密度比較:對照組＜藥物干預組＜模型組，組間比較有統(tǒng)計學意義(79.41±7.85 vs 127.11±13.04 vs 141.07±9.39，均P＜0.05)。
　　結論：
　　1.心肌肥厚組織中FGF-2表達升高，提示FGF-2可促進異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展。
　　2.培哚普利干預組大鼠心肌組織中FGF-2的表達明顯低于模型