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文檔簡介
1、目的:了解腸桿菌科細(xì)菌中IMP型金屬β-內(nèi)酰胺酶的流行病學(xué)特點(diǎn);對(duì)攜帶IMP耐藥基因的質(zhì)粒做整合子結(jié)構(gòu)分析,以期發(fā)現(xiàn)IMP基因的傳播機(jī)制。
方法:采用K-B法篩選同濟(jì)醫(yī)院2007年8月至2011年10月分離的腸桿菌科細(xì)菌中對(duì)美羅培南及亞胺培南均不敏感的菌株,即抑菌環(huán)直徑小于23mm的菌株。用PCR方法檢測IMP基因,并回顧分析IMP陽性菌株臨床資料;用瓊脂稀釋法檢測常用抗菌藥物對(duì)IMP陽性菌株的最低抑菌濃度(Minimum I
2、nhibition Concentration,MIC),以獲得IMP陽性菌株的藥敏譜;用多位點(diǎn)序列分型(Multiple Locus Sequence Typing,MLST)方法對(duì)IMP陽性的肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌進(jìn)行同源性分型;用質(zhì)粒接合試驗(yàn)檢測攜帶IMP基因的耐藥質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性,并獲得含有攜帶IMP基因質(zhì)粒的接合菌,以進(jìn)一步用重疊PCR方法分析攜帶IMP基因的耐藥質(zhì)粒結(jié)構(gòu),探索其傳播機(jī)制。
結(jié)果:2007年8月至201
3、1年10月同濟(jì)醫(yī)院共分離125株對(duì)美羅培南及亞胺培南不敏感的腸桿菌科細(xì)菌,以肺炎克雷伯菌最為常見,其次為陰溝腸桿菌與大腸埃希菌;用PCR方法檢測IMP基因,28株陽性,占22.4%(28/125)。分析IMP陽性菌株的臨床特點(diǎn)發(fā)現(xiàn),菌株多分離自兒科患者(57.1%,16/28),并以痰標(biāo)本居多(71.4%,20/28);瓊脂稀釋法藥敏試驗(yàn)顯示,IMP陽性菌株對(duì)阿米卡星和左氧氟沙星的敏感率高于70%,對(duì)亞胺培南的敏感率為71.4%,對(duì)美羅
4、培南的敏感率為32.1%;肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌MLST結(jié)果顯示出多種序列型別,并且在13株肺炎克雷伯菌中發(fā)現(xiàn)了4個(gè)新的ST型(ST-734,ST-735,ST-736,ST-752);通過接合實(shí)驗(yàn)獲得9株含攜帶IMP基因質(zhì)粒的接合菌,經(jīng)整合子結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),IMP基因多以“單個(gè)基因盒”或串聯(lián)Ⅰ型整合酶的形式存在。
結(jié)論:耐碳青霉烯類抗菌藥物的腸桿菌科細(xì)菌檢出率呈現(xiàn)上升的趨勢(shì),常見于肺炎克雷伯菌。IMP耐藥基因多以單個(gè)基因盒的
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