CTSD和VLDLR基因?qū)﹄u蛋蛋黃沉積作用的研究.pdf

1、蛋黃不僅具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,在醫(yī)藥保健方面也有著重要的作用,因此,近年來蛋黃含量高的雞蛋越來越受到人們的青睞,如何提高雞蛋中蛋黃含量逐漸成為研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)。
　　通過增加雞蛋形成過程中蛋黃的沉積量可以提高蛋黃含量。卵黃的形成是由卵泡膜上極低密度脂蛋白受體(very low dens-ity lipoprotein receptor,VLDLR)蛋白介導(dǎo)的胞吞轉(zhuǎn)運(yùn)過程。VLDLR對(duì)于蛋黃的主要成分卵黃蛋白原(vitellogene

2、sis,VTG)和極低密度脂蛋白(VLDL)的轉(zhuǎn)運(yùn)過程及其在卵黃膜上的沉積過程起著非常重要的作用。在VLDL轉(zhuǎn)運(yùn)蛋黃主要成分的胞吞過程中,組織蛋白酶D(Cathepsin D,CTSD)是轉(zhuǎn)運(yùn)過程的關(guān)鍵酶。因此,本課題研究VLDLR和CTSD基因?qū)﹄u蛋蛋黃沉積作用的影響。
　　本研究采用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法,檢測(cè)VLDLR基因和CTSD基因在山東地方雞種汶上蘆花雞、濟(jì)寧百日雞和萊蕪黑雞中的多態(tài)性,并分析各多態(tài)位點(diǎn)

3、不同基因型與4個(gè)蛋黃性狀的相關(guān)性。研究結(jié)果如下:
　　(1)VLDLR基因的SNPs檢測(cè)及其與雞蛋蛋黃性狀的關(guān)聯(lián)分析:
　　在3個(gè)供試群體中共檢測(cè)到2個(gè)具有生物學(xué)意義的SNP位點(diǎn),即第6外顯子8467nt處的G→A突變(V8467)和第17內(nèi)含子13876nt處的A→G突變(V13876)。最小二乘分析結(jié)果表明,V8467和V13876兩處SNPs位點(diǎn)對(duì)蛋黃重均有極顯著影響(P<0.01),對(duì)蛋黃高度有顯著影響(P<0.05

4、),此外V13876對(duì)蛋黃高度也有顯著影響(P<0.05);其中,V8467位點(diǎn)的BB基因型個(gè)體和V13876位點(diǎn)的AA基因型個(gè)體在蛋黃沉積作用方面具有較大優(yōu)勢(shì),而其他基因型不利于提高蛋黃比例。雙倍型對(duì)蛋黃重、蛋黃比率均達(dá)到極顯著水平(P<0.01),對(duì)蛋黃高度達(dá)到顯著水平(P<0.05)。
　　(2)CTSD基因的SNPs檢測(cè)及其與雞蛋蛋黃性狀的關(guān)聯(lián)分析:
　　在3個(gè)供試群體中共檢測(cè)到2個(gè)SNPs位點(diǎn),分別在第3外顯子26

5、14nt處C→T突變(CTSD3)和第4內(nèi)含子5274nt處G→T突變(CTSD5274)。最小二乘分析表明,exon3和intron4兩處SNPs位點(diǎn)對(duì)蛋黃重均存在極顯著性影響(P<0.01);exon3處不同基因型的蛋黃高度還存在顯著性差異(P<0.05),inton4處不同基因型的蛋黃比率存在顯著性差異(P<0.05),蛋黃高度存在極顯著性差異(P<0.01)。其中,兩個(gè)位點(diǎn)的AB基因型個(gè)體在蛋黃沉積作用方面具有較大優(yōu)勢(shì)。雙倍型對(duì)