嬰兒配方乳粉中維生素B12檢測(cè)方法的研究.pdf

1、目的:維生素B12又稱(chēng)氰鈷胺素。主要存在于動(dòng)物性食品中，深紅色針狀晶體，結(jié)構(gòu)性質(zhì)穩(wěn)定。它是維持正常造血功能、促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)、保持神經(jīng)系統(tǒng)功能的必需維生素，對(duì)人體健康具有重要作用。維生素B12在食品中的含量很低。嬰兒配方乳粉根據(jù)其類(lèi)母乳化食品的要求，需要添加符合國(guó)家要求含量的維生素B12。本文論述了近年來(lái)維生素B12檢測(cè)方法的研究現(xiàn)狀，分析了各種檢測(cè)方法的特點(diǎn)，并根據(jù)實(shí)際檢驗(yàn)需要和嬰兒配方乳粉的特點(diǎn)對(duì)維生素B12檢測(cè)方法進(jìn)行了研究。研究出了

2、高效液相色譜紫外檢測(cè)與熒光檢測(cè)兩種不同的方法。
　　 方法:嬰兒配方乳粉的基質(zhì)復(fù)雜，本文針對(duì)其特點(diǎn)對(duì)樣品的前處理方法進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究，探索出了以弱酸緩沖液除雜蛋白，固相萃取柱凈化提取液，高純氮?dú)獯祾邼饪s維生素B12為主要特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)方法，為高效液相色譜的檢測(cè)提供了條件。而在熒光檢測(cè)中，為使維生素B12具有熒光性，需要在前處理中對(duì)其進(jìn)行衍生轉(zhuǎn)化，主要采用強(qiáng)堿熱處理，裂解分子結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生具有熒光性的α—核唑磷酸。本文對(duì)色譜條件進(jìn)行了

3、摸索，提出了一套新的而又切實(shí)可用的色譜檢測(cè)方法。在高效液相紫外檢測(cè)方法研究中:采用BDS HYPERSIL C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），以水-乙腈為流動(dòng)相;流速0.25ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)361nm，柱溫40℃。洗脫梯度:0-10min，乙腈在流動(dòng)相中的比例為10％;10-35min，乙腈的比例線性升到30％。在高效液相熒光檢測(cè)的方法研究中:采用C18 MG色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-磷酸緩沖

4、鹽為流動(dòng)相;流速1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)250/312nm，柱溫25℃。洗脫梯度:0-5min，乙腈在流動(dòng)相中的比例為10％;5-30min，乙腈的比例線性升到15％。
　　 結(jié)果:紫外檢測(cè)方法:維生素B12的檢出限為20ng/ml，線性范圍在0.0505～3.232μg/ml，重復(fù)性實(shí)驗(yàn)的RSD％為2.5289％，回收率在92.23％-96.68％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.04％。熒光檢測(cè)方法:維生素B12的檢出限為50n

5、g/ml，線性范圍在0.075525～4.8336μ g/ml，重復(fù)性實(shí)驗(yàn)的RSD％為8.626％，回收率在86.37％-92.68％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.68％。本文探索并優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件，將維生素B12在不同固相萃取柱與色譜柱上的保留特性進(jìn)行了比較研究，定性定量分析了乳粉中的維生素B12。在對(duì)數(shù)種嬰兒配方乳粉的檢驗(yàn)中取得了滿意的效果。這兩種檢測(cè)方法高效、快捷，滿足了嬰兒配方乳粉中維生素B12檢測(cè)的實(shí)際需要，達(dá)到了實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。同時(shí)