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文檔簡介
1、寧夏枸杞(Lycium Barbarum L.)是茄科(Solanaceae)落葉小灌木的成熟果實,是我國傳統(tǒng)的中藥材和保健品?,F(xiàn)代科學(xué)對寧夏枸杞的研究越來越多,主要涉及枸杞多糖、甜菜堿、類胡蘿卜素、黃酮、枸杞籽油等營養(yǎng)成分。然而,目前國內(nèi)外對寧夏枸杞蛋白的研究卻少見報道,特別是枸杞蛋白的食品功能特性研究處于空白階段。為了充分開發(fā)利用寧夏枸杞蛋白這一有效營養(yǎng)成分,本論文以超臨界CO2萃取枸杞籽油后的枸杞籽粕為原料,探討了寧夏枸杞蛋白的制
2、備方法和制備工藝,在這個基礎(chǔ)上對枸杞分離蛋白的理化性質(zhì)和功能特性、分離純化及蛋白組份氨基酸組成成分進行了系統(tǒng)的分析研究。主要研究成果如下:
(1)探討枸杞蛋白的制備方法。主要采用了堿提酸沉法、乙醇制備法、蛋白酶提法和堿提法,對比四種方法所制備的枸杞蛋白含量及成品表觀色澤,最終確定采用成本低廉、得率較高、技術(shù)操作簡便、易控制的傳統(tǒng)堿提酸沉法。制備的枸杞籽蛋白的蛋白含量約67%,得率19.67%。
(2)確定制備
3、枸杞蛋白的最佳工藝。在單因素實驗基礎(chǔ)上,通過中心組合試驗和響應(yīng)面分析,研究了不同料液比、提取溫度、提取pH值、提取時間對枸杞蛋白提取率的大小影響。得出堿提酸沉法制備枸杞籽分離蛋白的最佳工藝為:料液比:1:13、提取溫度:45.41℃、提取pH值:10.5、提取時間:2.5h,枸杞籽分離蛋白最大提取率的預(yù)測值為69.423%,實際值為69.4251%,RSD為0.003%。實際生產(chǎn)中可以考慮各種因素,適當(dāng)調(diào)整工藝條件。
(3
4、)研究了寧夏枸杞分離蛋白的主要理化性質(zhì)和功能特性。寧夏枸杞籽分離蛋白主要由6種不同相對分子質(zhì)量(48、35、32、20.4、19、18.5kD)的蛋白亞基組成;枸杞籽分離蛋白的氨基酸組成較平衡,蛋氨酸為第一限制氨基酸,谷氨酸含量偏高;枸杞籽分離蛋白的吸油性、乳化性、乳化穩(wěn)定性和氣泡穩(wěn)定性良好,溶解性和吸水性一般,起泡性則相對較差;枸杞籽分離蛋白的最低凝膠點(LGE)為7g/100mL,當(dāng)枸杞籽分離蛋白溶液的質(zhì)量濃度達到10zd:00mI
5、。時可以形成外觀堅固、成形性非常好的凝膠;枸杞籽分離蛋白分子之間的結(jié)構(gòu)不是很穩(wěn)定,隨著溶液放置時間的增加,蛋白分子水合作用減弱,其蛋白-蛋白分子間作用力增強,從而導(dǎo)致了枸杞籽分離蛋白溶液表觀黏度的上升。
(4)研究了枸杞籽分離蛋白的初步分離純化。用DEAE-Sepharose FF進行梯度和線性洗脫,確定了洗脫液濃度有4個,分別為0.32M、0.42M、0.5M、0.69M NaCl溶液,經(jīng)SDS-PAGE電泳證明線性洗脫
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