常規(guī)膜乳化法制備大粒徑瓊脂糖微球.pdf

1、瓊脂糖凝膠介質(zhì)是多糖類層析分離介質(zhì)中應(yīng)用最廣的一種。作為一種天然的多糖材料，瓊脂糖微球由于具有多孔性、親水性、不含帶電基團以及多糖鏈上的羥基在一定的條件下可以偶聯(lián)上不同的配基等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、復(fù)合大分子、核酸、多糖、質(zhì)粒以及病毒的分離純化。 目前層析分離中主要應(yīng)用的瓊脂糖微球，如Sepharose4FF、Sepharose6FF以及以此為基礎(chǔ)偶聯(lián)不同配基所制備的一系列疏水、親和、離子交換介質(zhì)等，其平均粒徑均在90微米左右

2、，粒徑分布范圍一般在45-165微米之間。 由于傳統(tǒng)方法制備得到的大粒徑瓊脂糖微球存在粒徑分布較寬，制得微球需要通過復(fù)雜的后期篩分過程來進行分離，產(chǎn)品的收率低以及制備重復(fù)性差等問題，本論文提出通過微孔膜乳化法制備大粒徑瓊脂糖微球，并對膜乳化法制備瓊脂糖微球過程中影響粒徑和粒徑分布的因素進行了討論。 本文以6%的瓊脂糖溶液為水相，不同體積配比的液體石蠟（LP）和石油醚（PE）的混合溶液為油相，采用微孔膜乳化法制備了平均粒徑

3、為90微米的瓊脂糖微球?？疾炝宋⒖啄つた状笮?、油相組成、乳化劑種類、乳化劑濃度、反應(yīng)溫度、壓力、水相原料、水相加熱時間、磁子轉(zhuǎn)數(shù)、固化過程中的機械攪拌速度等因素對成球粒徑及粒徑分布的影響，并從油水相間界面張力、油水相粘度等方面對形成的瓊脂糖微球粒徑及均一性進行了解釋。 結(jié)果表明，當(dāng)使用膜孔大小為25．9微米的微孔膜；油相組成為體積比11：1的液體石蠟與石油醚的混合溶液；乳化劑為1%的PO-5S；操作溫度為65℃；Promega公