三種食用菌多糖提取分離及降血糖和抗氧化作用的研究.pdf

1、食用菌豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，較高的多糖等生物活性物質(zhì)含量決定了它具有多種保健作用，特別是抗氧化、降血糖作用。金頂側(cè)耳（Pleurotus citrinopileatus Sing）、姬菇(Pleurotus cornucopiae)和毛頭鬼傘(Coprinus comatus)都是近年來(lái)具有開(kāi)發(fā)和推廣價(jià)值的珍稀優(yōu)質(zhì)食用菌，他們營(yíng)養(yǎng)豐富，具有多種保健及藥用價(jià)值。
　　 本文對(duì)金頂側(cè)耳、姬菇和毛頭鬼傘子實(shí)體多糖采取熱水提取法得到粗多糖，粗

2、多糖經(jīng)脫蛋白、透析等步驟后得到精多糖。粗多糖得率在31～38％間，多糖含量在20～51％間；精多糖得率在15～19％間，多糖含量在48～75％間。金頂側(cè)耳、姬菇精多糖經(jīng)Sepharose4B 分離，分別得到一個(gè)大分子多糖組分Ⅰ（得率為2.49％和6.53％）和一個(gè)小分子多糖組分Ⅱ（得率為1.36％和2.85％），其中金頂側(cè)耳這兩個(gè)多糖組分有O2-的清除活性，兩種多糖組分Ⅰ的多糖含量為92％和93％，在波長(zhǎng)260nm和280nm處無(wú)明顯的

3、吸收，表明兩種多糖不含核酸和蛋白質(zhì)；紅外光譜顯示它們具有多糖特征吸收峰，屬于α-型吡喃糖苷鍵。用Sephadex G-200 凝膠柱層析法測(cè)得金頂側(cè)耳、姬菇和毛頭鬼傘多糖的平均分子量分別約為382208、303774和523359。三種食用菌粗多糖總黃酮含量在3.0～7.0mg/g 間，總酚含量在2.0～5.0mg/g 間，蛋白含量在30～45％間，粗多糖精制后多糖含量上升30％左右，姬菇和毛頭鬼傘精多糖含量達(dá)70％以上。金頂側(cè)耳、姬菇

4、和毛頭鬼傘精多糖與粗多糖相比對(duì)O2－清除率分別提高62.5％,58.3％和51.5％；對(duì)OH·清除率分別提高33.1％,42.3％和33.2％；對(duì)DPPH·清除率分別提高56.0％,63.5％和60.3％。粗多糖經(jīng)精制后，多糖含量明顯提高，自由基清除能力明顯提高，表明多糖是清除自由基的主要功效成分。
　　 在分析了三種食用菌粗多糖的生物活性物質(zhì)、多糖含量和清除自由基活性后，研究了粗多糖的體內(nèi)降血糖和抗氧化作用。通過(guò)小鼠腹腔注射四

5、氧嘧啶建立動(dòng)物糖尿病模型，以金頂側(cè)耳和姬菇粗多糖(400mg/kg)分別灌胃糖尿病小鼠28天，同時(shí)以降糖靈(100mg/kg)為藥物治療組，以正常小鼠為對(duì)照組，測(cè)定了0、6、14、21、28d 時(shí)空腹血糖值和28 d 時(shí)糖耐量。動(dòng)物處死后，取血液測(cè)定小鼠糖化血紅蛋白(GHB)含量及血脂水平，并測(cè)定了小鼠血液和臟器的抗氧化指標(biāo)。結(jié)果表明，與模型組比，灌胃食用菌粗多糖能明顯改善糖尿病“三多一少”病癥，能顯著降低空腹血糖值(P<0.01)和血

6、糖曲線下面積(AUC)(P<0.01)，給予兩種食用菌粗多糖后血糖下降百分率都大于15％，并使GHB含量恢復(fù)到正常水平(P>0.05)，還能使糖尿病小鼠膽固醇(TC)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量恢復(fù)到正常水平。金頂側(cè)耳和姬菇粗多糖能夠顯著提高糖尿病小鼠血液超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)和過(guò)氧化氫酶（CAT）活力和非酶體系抗氧化能力，抑制丙二醛（MDA）
　　 形成，提高谷胱甘肽（GSH）含

7、量和總抗氧化能力（TAOC），同時(shí)也能顯著提高小鼠肝和腎的SOD、CAT活性及GSH含量，降低MDA含量。
　　 多糖是三種食用菌清除自由基的主要功效成分，且本研究已表明粗多糖具有一定的降血糖和抗氧化功效，在此基礎(chǔ)上將粗多糖進(jìn)行提純，進(jìn)一步研究精多糖的降血糖和抗氧化作用。
　　 通過(guò)小鼠腹腔注射四氧嘧啶建立動(dòng)物糖尿病模型，以金頂側(cè)耳、姬菇和毛頭鬼傘精多糖(低劑量組100mg/kg，高劑量組400mg/kg)分別灌胃糖尿病

8、小鼠30天，同時(shí)以優(yōu)降糖(100mg/kg)為藥物治療組，以正常小鼠和灌胃金頂側(cè)耳、姬菇和毛頭鬼傘精多糖(400mg/kg)正常小鼠為對(duì)照組，測(cè)定0、7、14、22、30 d 時(shí)空腹血糖值和30d 時(shí)糖耐量。動(dòng)物處死后，取血液測(cè)定小鼠糖化血紅蛋白(GHB)含量、血脂指標(biāo)及肝臟TG 水平，測(cè)定小鼠血液和臟器的抗氧化指標(biāo)，并采用4％～35％的聚丙烯酰胺梯度凝膠電泳分析抗氧化酶同工酶。結(jié)果表明：灌胃三種食用菌精多糖 30天后與模型組比能明顯改

9、善糖尿病“三多一少”病癥，能顯著降低空腹血糖值和AUC(P<0.01)，其中多糖高劑量組小鼠血糖下降百分率大于7％，多糖高劑量組的這些指標(biāo)都達(dá)到了藥物組治療水平，并使GHB和肝糖原含量恢復(fù)到正常水平(P>0.05)。糖尿病小鼠甘油三酯(TG)、HDL-C和總脂(TL)含量在給予食用菌精多糖后能恢復(fù)到正常水平。與模型組相比，三種食用菌精多糖能顯著提高糖尿病小鼠血液和肝臟SOD、CAT、GSH-Px活力和非酶體系抗氧化能力，抑制MDA 形成