谷胱甘肽濃度響應(yīng)的納米給藥系統(tǒng)的構(gòu)建與評價.pdf

1、武漢理工大學(xué)碩士學(xué)位論文谷胱甘肽濃度響應(yīng)的納米給藥系統(tǒng)的構(gòu)建與評價姓名：龔嘯宇申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：藥學(xué)指導(dǎo)教師：鄭化201205PTAgCMCS高分子前藥中6MP的釋放是GSH濃度依賴型的。同時，釋放介質(zhì)的pH和高分子前藥中藥物含量對釋放行為影響不大。(3)以PTAgCMCS高分子前藥為基材，采用超聲法構(gòu)建PTAgCMCS納米給藥系統(tǒng)并對其制備條件進行優(yōu)化。采用穩(wěn)態(tài)熒光探針法測定兩種不同藥物含量的高分子前藥臨界膠束濃度；采用動態(tài)光散

2、射法測定納米粒的水力學(xué)半徑及其粒度分布并測定納米粒的zeta電勢；采用透射電鏡和掃描電鏡觀測納米粒的形態(tài)和粒徑。結(jié)果表明，超聲法制備PTA下CMCS納米給藥系統(tǒng)，最佳制備條件為：介質(zhì)pH56~74；PTA—2_CMCS濃度為1~4mg／mL。超聲波細胞破碎儀處理4min(輸出功率100W，間歇脈沖方式：脈沖寬度2Os，間歇時間20s)。PTAgCMCSl與PTAgCMCS2的臨界膠束濃度分別為00079mg／mL和002422mg／mL

3、。DLS測定納米給藥系統(tǒng)的水力學(xué)粒徑介于104～285nm之間，在偏酸性緩沖溶液中粒徑比偏堿性緩沖溶液中小。給藥系統(tǒng)的聚合物分散系數(shù)較低。同時，其zeta電勢介于123～201mV。經(jīng)SEM和TEM觀察，PTAgCMCS納米粒呈完整的球形結(jié)構(gòu)，且在偏酸性緩沖溶液中粒徑比偏堿性緩沖溶液中小。(4)對HL60細胞和小鼠成纖維細胞L929細胞系進行了體外細胞培養(yǎng)，并采用M1vr法研究了PTAgCMCS高分子前藥對兩種細胞的毒性。主要考察高分子

4、前藥濃度與其毒性關(guān)系，GSH作用對該高分子前藥毒性的影響。結(jié)果表明，PTAgCMCS濃度越大，其毒性越大。對HL一60細胞的研究表明，在每個濃度梯度上，陽性對照組抑制率最大，而實驗組中A組(不含額外GSH刺激)抑制率最小，B組(含額外添加GSH)抑制率介于兩者之間。這說明PTAgCMCS高分子前藥的毒性與其濃度有關(guān)，另外通過GSH刺激，發(fā)現(xiàn)PTAgCMCS對HL一60細胞的抑制作用與GSH濃度刺激有關(guān)。對小鼠成纖維細胞L929細胞系的體

5、外毒性試驗表明，PTAgCMCS這種高分子前藥比游離的6MP毒性更低。對比HL60細胞和小鼠成纖維細胞L929數(shù)據(jù)可知，PTAgCMCS對HL一60細胞的抑制率更大。因此，PTAgCMCS高分子前藥能自組裝成納米粒，并能響應(yīng)GSH的刺激而釋藥。與正常細胞相比，其對病變的癌細胞更為敏感，且其毒性是GSH濃度依賴型的。這種GSH濃度依賴型的納米給藥系統(tǒng)有望應(yīng)用于6一巰基嘌呤的體內(nèi)傳遞。關(guān)鍵詞：羧甲基殼聚糖，6巰基嘌呤，高分子前藥，納米給藥系