秸稈對(duì)家蠅幼蟲(chóng)木質(zhì)纖維代謝酶的誘導(dǎo)、表達(dá)及木質(zhì)纖維降解菌的篩選.pdf

1、目的：研究家蠅對(duì)農(nóng)業(yè)秸稈的消化利用及體內(nèi)相關(guān)糖苷水解酶基因的誘導(dǎo)表達(dá)，篩選體內(nèi)降解纖維素、木質(zhì)素、半纖維素的共生菌，為今后家蠅作為資源化昆蟲(chóng)對(duì)秸稈等生物質(zhì)能的合理利用和開(kāi)發(fā)奠定科學(xué)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1.使用含30％麥麩的高粱秸稈粉、30%麥麩的麥秸稈粉和純麥麩分別飼養(yǎng)家蠅幼蟲(chóng)，檢測(cè)處理前后及無(wú)幼蟲(chóng)培養(yǎng)對(duì)照組飼料中粗蛋白、粗脂肪、總糖、纖維素、木質(zhì)素、半纖維素含量變化；同時(shí)觀察三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的幼蟲(chóng)期、3日齡幼蟲(chóng)體重、蛹期、羽

2、化率、成蟲(chóng)存活期及雌雄比。
　　2.家蠅內(nèi)參基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)在不同飼料飼養(yǎng)、不同發(fā)育期及不同組織的穩(wěn)定性研究；將2.5g的純木質(zhì)素、纖維素、木聚糖（半纖維素）溶于20ml滅菌水，均勻混于濕度適宜的麥麩(50g干重)中飼養(yǎng)家蠅幼蟲(chóng)，觀察BG、BGL、LAC、MAN基因的表達(dá)差異；使用純高粱秸稈、麥秸稈代替麥麩飼養(yǎng)家蠅，依次傳代，觀察家蠅上述基因在家蠅傳代過(guò)程中的表達(dá)差異。
　　3.用純麥麩、高粱秸桿、麥

3、秸稈喂養(yǎng)家蠅幼蟲(chóng)后，分別用纖維素-剛果紅培養(yǎng)基、木質(zhì)素培養(yǎng)基、木聚糖培養(yǎng)基在需氧和厭氧條件下篩選纖維素降解真菌、木質(zhì)素降解真菌和細(xì)菌、半纖維素降解細(xì)菌和真菌，觀察不同飼養(yǎng)組的菌落形態(tài)、數(shù)量。
　　結(jié)果：
　　1.不同組飼養(yǎng)后及對(duì)照組的總糖、纖維素、木質(zhì)素、半纖維素含量較飼養(yǎng)前都有一定程度的降低(P<0.05)，且家蠅幼蟲(chóng)處理后比對(duì)照組降低的百分點(diǎn)更多（P<0.05）；麥麩組、高粱秸稈組處理后及對(duì)照組相比處理前脂肪含量增加（P

4、<0.05）；高粱秸稈組和麥秸稈組的家蠅處理后飼料及對(duì)照組與處理前相比，粗蛋白含量都升高(P<0.05)。
　　2.家蠅GAPDH基因在不同飼料飼養(yǎng)、不同發(fā)育期及不同組織的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，表達(dá)較穩(wěn)定。
　　3.使用高粱秸稈粉，麥秸稈粉和麥麩分別飼養(yǎng)家蠅，我們發(fā)現(xiàn)幼蟲(chóng)期、蛹期、羽化率、成蟲(chóng)存活期及3日齡幼蟲(chóng)體重均表現(xiàn)差異性(P<0.05)，成蟲(chóng)雌雄比例無(wú)差異。
　　4.使用木質(zhì)素、纖維素、半纖維素喂

5、養(yǎng)刺激家蠅后，家蠅BG、BGL、LAC、MAN基因均呈現(xiàn)上調(diào)(P<0.05)，但上調(diào)幅度各有不同。
　　5.以麥麩為對(duì)照組，上述基因在高粱秸桿組和麥秸稈組傳代中均呈現(xiàn)上調(diào)(P<0.05)，趨勢(shì)不同。
　　6.篩選的能降解纖維素、半纖維素、木質(zhì)素的需氧真菌數(shù)量均大于厭氧真菌，細(xì)菌數(shù)量大于真菌數(shù)量(P<0.05)。纖維素降解真菌數(shù)量呈現(xiàn)高粱秸稈組>麥麩組>麥秸稈；木質(zhì)素降解細(xì)菌、真菌數(shù)量均表現(xiàn)為高粱桿組>麥秸稈組>麥麩組；半纖維