細(xì)胞熒光染料的設(shè)計(jì)、合成與性質(zhì)研究.pdf

1、二十世紀(jì)的四十年代熒光標(biāo)記技術(shù)第一次走進(jìn)了人類的視線。隨著科學(xué)技術(shù)迅猛的發(fā)展與進(jìn)步，現(xiàn)代分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)也得到了飛速發(fā)展。各種先進(jìn)的檢測(cè)儀器逐漸的被發(fā)明，并應(yīng)用到實(shí)際中來。細(xì)胞熒光染料作為一種無毒，并且沒有任何放射性的熒光標(biāo)記物逐漸的引起了廣大科學(xué)工作者的重視。由于，菁類的細(xì)胞熒光染料具有良好的剛性平面，其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)在400 nm到1000 nm范圍內(nèi)是可調(diào)控的，而且染料分子還有相對(duì)比較大的摩爾消光系數(shù)等優(yōu)點(diǎn)。我們選定并設(shè)計(jì)了發(fā)射波

2、長(zhǎng)在650 nm左右的五甲川染料作為目標(biāo)產(chǎn)物。在兩端的母體的苯環(huán)上引入磺酸鹽作為取代基，以增加染料分子的水溶性，在中間的甲川鏈上引入氯或者溴來增大空間位阻，用以增強(qiáng)染料的穩(wěn)定性。與此同時(shí)，在母體的氮位上連接不同的取代基來到達(dá)不同的效果。本文對(duì)菁染料的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和分類進(jìn)行了系統(tǒng)的介紹，并且綜述了染料分子的合成進(jìn)展以及應(yīng)用現(xiàn)狀。而且我們還對(duì)現(xiàn)有細(xì)胞熒光染料的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)進(jìn)行了一定程度的總結(jié)。
　　2,3-二氯丁烯醛酸和2,3-二溴丁烯醛酸

3、分別于苯胺溶液反應(yīng)得到縮合劑2-氯丙二醛二苯胺和2-溴丙二醛二苯胺。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中通過多組實(shí)驗(yàn)的對(duì)比研究摸索出最佳的反應(yīng)條件、時(shí)間以及原料配比。在最佳的合成條件下，產(chǎn)率明顯提高，并合成出高純度的2-氯丙二醛二苯胺和2-溴丙二醛二苯胺。
　　首先我們以對(duì)氨基苯磺酸為原料，選用亞硝酸鈉與氨基發(fā)生反應(yīng)制成重氮鹽，然后選用亞硫酸氫鈉作為還原劑。再經(jīng)過酸化水解的方法得到產(chǎn)物。這樣就簡(jiǎn)化了中間步驟繁瑣的提純過程。避免了因提純過程中溫度的升高導(dǎo)致

4、重氮鹽的分解。操作過程簡(jiǎn)便的同時(shí)有效的提高了反應(yīng)的產(chǎn)率。
　　接下來以合成的對(duì)肼基苯磺酸為原料，與3-甲基-2-丁酮發(fā)生反應(yīng)得到苯環(huán)上帶有磺酸基的吲哚環(huán)。然后進(jìn)一步與氫氧化鉀反應(yīng)得到帶有磺酸鹽的吲哚環(huán)。分別選用碘乙烷、6-溴己酸、對(duì)氯甲基苯甲酸、1,4-丁基磺酸內(nèi)酯四種烷基化試劑與吲哚環(huán)發(fā)生烷基化反應(yīng)得到 N位上有不同取代基的四種母體。再用得到的四種母體分別于兩種縮合劑，即2-氯丙二醛二苯胺和2-溴丙二醛二苯胺發(fā)生反應(yīng)這樣就得到了