酪氨酸蛋白激酶Lyn、Tec蛋白相互作用光激化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑的研制.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2013級碩士學(xué)位論文酪氨酸蛋白激酶Lyn、Tee蛋白相互作用光激化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑的研制Developmentofdiagnosticreagentsfortyrosine—proteinkinaseLyn，Tecinteractionusingamplifiedluminescentproximityhomogeneousassay課題來源：國家“863”科技計劃項(xiàng)目(2014AA020904)學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名

2、稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會主席答辯委員會委員張佳風(fēng)羅樹紅教授應(yīng)用生物學(xué)學(xué)術(shù)型碩士研究生生物技術(shù)學(xué)院朱家勇教授余新炳教授何慶瑜教授黃杰副研究員鄭磊教授2016年5月30日廣州摘要如今，隨著技術(shù)發(fā)展，高通量的生物分子篩選分析對于自動化檢測儀器平臺的要求較迫切，而不需要通過洗滌分離結(jié)合標(biāo)記與游離標(biāo)記步驟的光激化學(xué)發(fā)光免疫分析(AlphaLISA)技術(shù)很好地滿足這一需求。光激化學(xué)發(fā)光免疫分析(Amplifiedluminescentp

3、roximityhomogeneousassayAlphaLISA)技術(shù)是由UllmanEF等在1994年發(fā)明的單線態(tài)氧分子能量傳遞發(fā)光免疫分析(LuminescentoxygenchannelingimmunoassayLOCI)技術(shù)發(fā)展而來，美國PerkinElmer公司則陸續(xù)生產(chǎn)推出二十多種AlphaScreen@試劑盒。該技術(shù)結(jié)合納米材料、激光技術(shù)和單線態(tài)氧半衰期短的三大優(yōu)勢，實(shí)現(xiàn)均相反應(yīng)，既克服了EIA技術(shù)的穩(wěn)定性差、CLIA

4、技術(shù)和ECLIA技術(shù)的無法重復(fù)測量及成本高等缺點(diǎn)，還由于發(fā)射峰為615nm處避開了血清以及組織中的其他成分的發(fā)射峰，因而在樣本的檢測上較先前的技術(shù)更具優(yōu)勢。AlphaLISA技術(shù)具有靈敏度高、線性范圍寬、反應(yīng)時間短、背景信號低，檢測重復(fù)性好，無需洗滌，無放射性污染，操作簡便，容易實(shí)現(xiàn)自動化和高通量等優(yōu)點(diǎn)，可對現(xiàn)有免疫學(xué)檢測產(chǎn)品進(jìn)行升級換代。目前已有報道該技術(shù)用于檢測包括如OX40受體與OX40L配體、雌激素受體(ER)和SteroidR

5、eceptorCoactivatorl(SRC1)、病毒蛋白E6和E6AP等蛋白質(zhì)之間相互作用的檢測。蛋白酪氨酸激酶(ProteinTyrosineKinase，PTK)是一類催化ATP上Y磷酸轉(zhuǎn)移至蛋白酪氨酸殘基并使多種底物發(fā)生磷酸化的激酶，分為受體型和非受體型酪氨酸蛋白激酶，其均在細(xì)胞生長、增殖、分化中具有重要作用。酪氨酸蛋白激酶Lyn(Tyrosine—ProteinKinaseLyn)亦稱JTK8，屬于非受體型酪氨酸蛋白激酶Sr