入射照明激光對激光掃描共聚焦顯微鏡成像影響的研究.pdf

1、激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser Scanning Confocal Microscopy)是研究微細(xì)結(jié)構(gòu)的有效技術(shù)手段和必備的大型科學(xué)儀器，在生物和工業(yè)檢測領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。該系統(tǒng)采用精密針孔濾波技術(shù)，使得只有處于焦平面位置上的信息能夠被探測，最大限度地抑制了非聚焦平面的雜散光，具有很高的成像分辨率和信噪比;同時系統(tǒng)沿Z軸方向可以實現(xiàn)無損光學(xué)斷層掃描，從而實現(xiàn)對較厚樣本的三維成像
　　本文通過理論建模并對模型進(jìn)行了計算分析，最

2、后搭建LSCM實驗光路進(jìn)行驗證，來說明入射激光對共聚焦顯微鏡成像質(zhì)量的影響。
　　理論建模是根據(jù)Richards-Wolf以及P.T(o)r(o)k的矢量衍射積分，建立了一套LSCM在N種介質(zhì)N-1層界面中照明點擴散函數(shù)(point spread function，PSF)的模型，并且計算得到零層和兩層界面兩種實際情況中的PSF。
　　根據(jù)理論建模的內(nèi)容，通過改變?nèi)肷浼す馄駪B(tài)、入射激光充溢系數(shù)βG以及改變探測的深度，得到了

3、點擴散函數(shù)的計算結(jié)果。結(jié)果表明，當(dāng)采用圓偏振光和線偏振光入射的時候，圓偏振光在一個方向的分辨率要優(yōu)于線偏振光，但是在相垂直的另一個方向上就略弱于線偏振光的分辨率。圓偏振光PSF在xy平面關(guān)于焦點旋轉(zhuǎn)對稱，將得到比較好的成像質(zhì)量。當(dāng)入射激光的充溢系數(shù)βG越小的時候，顯微鏡的分辨率越好。
　　根據(jù)共聚焦顯微鏡原理圖搭建了LSCM光路，通過改變?nèi)肷浼す鉅顟B(tài)的方式，驗證了影響共聚焦顯微鏡成像質(zhì)量的這些因素，結(jié)果表明圓偏振光入射成像質(zhì)量優(yōu)于