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文檔簡介
1、活體熒光成像技術(shù)作為光學(xué)成像的重要組成部分,有很多的優(yōu)點(diǎn),它的操作簡單、成本低,而且安全性高、成像的靈敏度高,能夠?qū)崿F(xiàn)對同一個目標(biāo)的變化進(jìn)行觀測?;谶@些優(yōu)勢,活體熒光成像已經(jīng)在生物研發(fā)的多個領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。得益于納米材料的小尺寸優(yōu)勢及其在物理化學(xué)的獨(dú)特性能,納米技術(shù)可以被廣泛應(yīng)用于生物診斷和熒光成像領(lǐng)域中。本論文選擇基于活體生物熒光成像的熒光金納米簇作為研究重點(diǎn)。相比于傳統(tǒng)熒光探針,熒光金納米簇具有近紅外區(qū)域熒光光譜、尺寸小、光
2、穩(wěn)定性好、熒光強(qiáng)度高、斯托克斯位移大等優(yōu)點(diǎn)。此外,因?yàn)闊晒饨鸺{米簇靈活的表面特性、良好的水溶性、以及細(xì)胞低毒性等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于生物熒光成像領(lǐng)域以及其他生物應(yīng)用中。
首先,本碩士論文分別介紹了兩種熒光金納米簇,基于四(4-羧基苯基)卟啉(TCPP)制備的熒光二氧化硅包裹的金納米顆粒簇(AuNPCs@SiO2-TCPP)和亞納米尺寸的金納米簇(AuNCs),并分別對這兩種簇狀結(jié)構(gòu)的納米金的制備方法、特性及其發(fā)展概況進(jìn)行了簡要的
3、敘述。
隨后,詳細(xì)介紹了制備AuNPCs@SiO2-TCPP和AuNCs的實(shí)驗(yàn)材料和方法。AuNPCs@SiO2-TCPP的制備主要分為金納米粒子制備、二氧化硅前驅(qū)制備和“一鍋法”共水解制備金納米顆粒簇三個步驟。采用控制變量法優(yōu)化制備條件,提高產(chǎn)物濃度和穩(wěn)定性。隨后,本文利用牛血清白蛋白BSA還原制備了AuNCs@BSA以及環(huán)RGD肽偶聯(lián)的AuNCs@BSA(RGD-AuNCs@BSA),并對其制備方法進(jìn)行了詳細(xì)描述,采用MT
4、T比色法評估不同濃度AuNCs@BSA細(xì)胞毒性。
最后,為了進(jìn)一步了解所制備產(chǎn)物的性質(zhì),采用多種測量手段分別對上述兩種熒光金納米簇的光譜、粒徑等進(jìn)行了表征。通過對表征結(jié)果的分析,發(fā)現(xiàn)優(yōu)化產(chǎn)物AuNPCs@SiO2-TCPP的光譜和顯微鏡結(jié)果都不甚理想,且制備方法步驟較為復(fù)雜、所用原料的毒性較大。而AuNCs@BSA的制備方法以BSA為制備原料,在水溶液中制備得到亞納米尺寸的熒光金納米簇。所得產(chǎn)物制備方法簡便、產(chǎn)物穩(wěn)定性好、細(xì)胞
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