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1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文小麥K型細(xì)胞質(zhì)雄性不育育性相關(guān)基因片段及TaLonl基因的分離與克隆姓名：劉立科申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：張愛民20031201AbstractThegeneexpressionpaaemsofanthersofKtypecytoplasmicmalesterilityline54l8A，maintainerline5418BrestorerlineShah229andhybrid(5418A
2、XShah229)Fiattetradstageofmeiosis，mononucleatestage，binucleatestageandtrinucleatestageofpollenwerecharacterizedwithDDRTPCRandcDNAAPLPtechniquesAtthesalnetimetheTaLonlgenewasisolatedthroughthehomologouscloningapproachTher
3、esultsageasfollowing1TheDDRTPCRwasoptimizedandamorestableDDRTPCRmethodwasestablishedBasedonthemethodofBachemetal，somemodificationsweremadeforcDNAAFLPthedigestofcDNAandtheligationwereperformedatthesametimeforsavingtime267
4、and72candidatebandsgeneratedbyDDRTPCRandcDNA—AFLPrespectivelywererecoveredfromdenaturedpolyacrylamidegelThetestofthecandidatebandswasimplementedbyreversedotblottingwithprobespreparedbylabelingthecDNAsof5418A，5418Bandhyri
5、datbinucleatestageofpollendevelopmentwithP“Fivefertilityrelatedpositivecandidatebandswereobtained，whichageDD59，DD63，AFLP49，AFLP55andAFLP82representingpyruvatedehydrogenaseElosubunit，glycosyltransferase，F(xiàn)boxmyotubularin，t
6、yrosyltRNAsynthetaserespectively，Amongthem，theexpressionsofAFLP49andAFLP55werehigherin5418A，whiletheexpressionsofDD59，DD63andAFLP82werelowerin5418AWithESTassemblymethod，wegotthecompleteopenreadingframeofpyruvatedehydroge
7、naseE1asubunitgeneinwheatTheputativewheatElQsubunitgenewaspredictedtoencodea421aminoacidproteinwithamolecularweightof46kDaUsingthePSORTprogram，thewheatElasubunitwaspredictedtolocateinthemitochondfialmatrixspace3Inyeastan
8、dhumantheATPdependentLonpmteaseplaysanimportantroleinremovaloftheabnormalproteinsandmaintainingmtDNAintegritySarriaetaldemonstratedthattheLonproteasehassomeeffectsoncytoplasmicmalesterility(CMS)incommonbeanInthisdisserta
9、tion，weisolatedagene，TaLonl，inwheatthatencodesaproductbelongingtotheLonproteasefamilyTaLonlshowsaconstitutiveexpressionpattern，whichindicatesthattheTaLonlplaysahousekeepingroleinwheatUnliketheIongeneinyeastandEcoiltheTaL
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