點擊化學18氟標記腫瘤靶向肽T7正電子分子探針合成及其初步評價.pdf

1、目的:
　　T7肽（序列為HAIYPRH）是運用噬菌體展示技術篩選而來具有特異性靶向轉鐵蛋白受體的多肽，對膠質瘤、肝細胞肝癌等高表達轉鐵蛋白受體的腫瘤具有特異性靶向作用，目前僅見其用于細胞親和性實驗及靶向載藥研究，尚未見到有關對其進行放射性標記的研究。本文根據(jù)其化學結構特點，在T7肽的氨基端修飾疊氮基，選用三甘醇作為18F標記中間體的起始反應物，運用點擊化學的方法，在“一鍋兩步”的反應中合成18F標記的T7多肽，制備新型的腫瘤顯像

2、探針，并進行初步的生物學評價，為將來進一步開發(fā)新的腫瘤特異性正電子放射性核素標記的分子探針奠定基礎。
　　方法:
　　多肽探針的合成制備主要分為非放射性合成和放射性實驗兩大部分。在非放射性合成中，以三甘醇為原料，使用常規(guī)的有機化學方式逐步合成含炔甲苯磺酸鹽(TsOTEGay)，并經(jīng)過核磁氫譜鑒定結構。在放射性實驗中，加速器產(chǎn)生的18F陰離子在K222/K2CO3乙腈溶液與標記前體TsOTEGay發(fā)生親核取代反應合成標記中間體

3、18F-TEGay。不經(jīng)過純化處理，把修飾有疊氮基的T7肽和點擊反應催化體系（CuSO4·5H2O、ASC及THPTA）混合后，通過點擊反應生成靶向腫瘤正電子探針18F-TEG-T7。同時合成標準品19F-TEG-T7并進行質譜分析。對放射性探針18F-TEG-T7經(jīng)過Radio-HPLC進行表征并與標準品對比確認，進一步分離純化。通過酯水分配系數(shù)實驗，了解探針的物理性質。將探針經(jīng)鼠尾靜脈注射入小鼠體內，以觀察其體內的分布情況。

4、　　結果:
　　標準品19F-TEG-T7的質譜分析分子量與理論值相符合。18F-TEG-T7采用兩步法成果合成，整個標記流程用時約120 min。Radio-HPLC結果示第一步親核取代反應得到標記中間體18F-TEGay的放化產(chǎn)率約78％±7.43％，第二步點擊反應得到18F-TEG-T7的放化產(chǎn)率約為28.26±7.43％（衰減校正后），兩步總放化產(chǎn)率為24.56％±15.59％(n=3)。18F-TEG-T7的脂水分配系數(shù)

5、為-0.51±0.01，正常小鼠體內分布實驗顯示18F-TEG-T7在正常小鼠體內腎臟的攝取最高，為4.09±0.86％ID/g，多肽探針主要通過腎臟代謝。
　　結論:
　　通過“一鍋兩步”點擊化學，成功制備出18F-TEG-T7新型多肽類分子探針，精簡了標記流程，減少了標記時間，并提高了探針的放化產(chǎn)率。18F-TEG-T7的正常小鼠體內分布顯示分子探針主要通過腎臟代謝。本研究結果有望用于進一步開發(fā)新的多肽類正電子分子探針。