產(chǎn)氨基?；该浊沟恼T變育種及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、氨基?；甘且环N能專一性水解DL-氨基酸的胞外酶，可將DL-氨基酸拆分獲得D-氨基酸和L-氨基酸，因而在食品、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域有著重要應(yīng)用。
　　本論文采用實驗室保藏的米曲霉A0菌株作為出發(fā)菌株，將其制備成原生質(zhì)體后進(jìn)行紫外-氯化鋰誘變，最終篩選出一株氨基酰化酶產(chǎn)量高且遺傳穩(wěn)定性好的誘變株A15。確定了該菌株制備原生質(zhì)體的最佳條件:菌齡為30h，復(fù)合酶配比為1.5％蝸牛酶，1％溶菌酶，1.5％纖維素酶，酶解反應(yīng)溫度為28℃，酶解反應(yīng)時間

2、為3h，0.8 mol/L NaCL滲透壓穩(wěn)定劑。在此條件下，米曲霉A0菌株的原生質(zhì)體形成率和再生率都較為理想。確定了紫外-氯化鋰誘變的最佳條件:誘變時間為80 s，誘變強(qiáng)度為15 cm，氯化鋰濃度為0.9％。在功率為15W的紫外燈的照射下，按以上條件進(jìn)行誘變處理。經(jīng)過初篩選出15株變色圈直徑與菌落直徑比值大于出發(fā)菌株的誘變株，再經(jīng)過復(fù)篩測定酶活力，篩選出5株酶活力明顯比出發(fā)菌體提高的菌株，其中突變株A15的酶活力比出發(fā)菌株A0的酶活力

3、提高了95.4％，高達(dá)589.7 U/g。
　　研究了碳源、氮源、碳氮比、料水比、接種量、表面活性劑、無機(jī)鹽、初始pH及培養(yǎng)溫度等單因素對高產(chǎn)氨基酰化酶菌株的影響，由實驗結(jié)果可知:最佳碳源是麥麩，最佳氮源是豆粕，最佳碳氮比是8∶2，最佳料水比是1∶1，最佳接種量是8％，最佳表面活性劑是0.1％的吐溫-80，最佳無機(jī)鹽是MgSO4，最適初始pH是7.0，最適培養(yǎng)溫度是30℃。
　　根據(jù)單因素試驗結(jié)果，進(jìn)行PB實驗及BBD實驗，