影響細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞在病毒性心肌炎中分布的相關(guān)研究.pdf

1、病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是由病毒感染心肌所致的以炎癥病變?yōu)橹鞯募膊?。本病的臨床表現(xiàn)差異很大，可從無癥狀到急性心力衰竭，猝死等。近年來，病毒性心肌炎在兒童、青少年中的發(fā)病率有逐年上升的趨勢，已成為兒童、青少年猝死的重要原因之一。因此，對病毒性心肌炎的研究引起人們普遍關(guān)注。目前國內(nèi)外關(guān)于VMC的診斷主要靠Dallas標(biāo)準(zhǔn)，但對于界限性心肌炎鑒別的不確定性及部分正常心肌組織中出現(xiàn)的單個或局灶炎細(xì)胞浸潤，使得對

2、一些鏡下心肌纖維病變不明顯、炎細(xì)胞浸潤較少的猝死案例難以作出準(zhǔn)確判斷，這給這些案例的死因鑒定帶來了一定困難。因此，尋找一種簡便且有效的檢測方法用于心肌炎的診斷以明確死因成為法醫(yī)病理學(xué)的一個亟需解決的問題。迄今為止，VMC的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，關(guān)于病毒性心肌炎的相關(guān)研究表明，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用對心肌細(xì)胞的破壞已成為心肌損傷致急性心力衰竭的主要原因。近來有研究表明一些細(xì)胞

3、因子在CTL的活化增殖及向病變區(qū)域遷移的過程中起重要作用。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，骨橋蛋白(osteopontin，OPN)的異常表達(dá)參與了部分心血管疾病的病理進(jìn)程，OPN表達(dá)的增強(qiáng)可引起T細(xì)胞的增殖活化并介導(dǎo)其的趨化遷移，造成嚴(yán)重的心肌損傷，導(dǎo)致心功能衰竭。另外，最近有國外研究表明，基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinases，MMP-2)在疾病中不僅可造成正常心肌膠原過度降解，使心肌膠原重構(gòu)，引起心肌纖維化，還可作為

4、一種有力的調(diào)節(jié)因子促進(jìn)免疫細(xì)胞的遷移，加重病變的發(fā)展。而尿激酶型纖溶酶原激活因子(urokinase type plasminogen activator，uPA)作為MMP-2的激活因子除了可通過間接的刺激MMP的活化參與病變進(jìn)程還可直接調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的表達(dá)，從而促進(jìn)VMC的發(fā)生與發(fā)展。但是，對于病毒性心肌炎猝死者心肌組織中的OPN、uPA、MMP-2的相關(guān)表達(dá)及其對CTL的影響，目前尚未十分清楚。
　　 目的:本次實(shí)驗(yàn)通過免疫

5、組化方法檢測OPN、uPA、MMP-2、CD8在人正常心肌和心肌炎組織的表達(dá)，探討OPN、uPA、MMP-2與CD8+T細(xì)胞的關(guān)系和在心肌炎進(jìn)展中的相互關(guān)系，為心肌炎猝死的病理學(xué)診斷、死因分析提供簡便、可行的監(jiān)測手段和依據(jù)。
　　 方法:收集大連醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)與法醫(yī)學(xué)教研室尸檢心肌炎病例存檔蠟塊共計40例，男27例，女13例，年齡在6-72歲。實(shí)驗(yàn)根據(jù)Dallas標(biāo)準(zhǔn)分為明確性心肌炎組（14例）和界限性心肌炎組（11例）及正常心

6、肌組（15例）。采用免疫組化方法檢測OPN、uPA、MMP-2、CD8在三組心肌組織的表達(dá)情況，并對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果:1、OPN、uPA、MMP-2三者在正常心肌不表達(dá)或弱表達(dá)，在界限性心肌炎和明確性心肌炎呈陽性和強(qiáng)陽性表達(dá)，主要表達(dá)在心肌細(xì)胞、炎細(xì)胞（主要是巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞）的胞漿。OPN、uPA、MMP-2在三組的表達(dá)均存在差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。2、CD8在正常心肌不表達(dá)，在心肌炎組表達(dá)升高

7、，且在界限性心肌炎組和明確性心肌炎組的表達(dá)存在差異(P＜0.05)。3、采用Spearman等級相關(guān)檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)OPN、uPA、MMP-2、CD8在心肌炎組的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。
　　 結(jié)論:1、在正常心肌組織中無CD8的表達(dá)，在心肌炎時細(xì)胞數(shù)量增多，提示CD8+T細(xì)胞在心肌炎時浸潤增加，參與心肌細(xì)胞損傷過程并作用于心肌炎的進(jìn)展。
　　 2、OPN、uPA、MMP-2在正常心肌少量表達(dá)，在心肌炎發(fā)生后表達(dá)顯著升高，三者的表