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1、E.coliO157:H7和沙門(mén)氏菌是牛羊等反芻動(dòng)物無(wú)癥狀攜帶的、嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全的人畜共患病致病菌。然而,由于較短的肉牛產(chǎn)業(yè)歷史和不同的飲食習(xí)慣,作為世界牛肉大國(guó)的中國(guó)未見(jiàn)有關(guān)于宰前動(dòng)物糞便和皮毛帶菌量、屠宰過(guò)程中E.coliO157:H7和沙門(mén)氏菌污染情況的研究報(bào)道。本課題的目的在于研究屠宰過(guò)程中E.coliO157:H7和沙門(mén)氏菌的流行分布情況,評(píng)估屠宰加工過(guò)程中上述兩種致病菌可能存在的易感環(huán)節(jié),為HACCP關(guān)鍵點(diǎn)的制定提供理
2、論依據(jù);通過(guò)對(duì)調(diào)查環(huán)節(jié)分離出的E.coliO157:H7和沙門(mén)氏菌進(jìn)行毒力基因及耐藥性分析,確定我國(guó)牛源E.coliO157:H7的毒性及沙門(mén)氏菌的血清型和耐藥性。
本研究的主要結(jié)果如下:
通過(guò)對(duì)4個(gè)肉牛屠宰廠7個(gè)取樣點(diǎn)(糞便、皮毛、去皮后、去臟后、噴淋后、排酸后、分割后)510個(gè)樣品的檢測(cè),從36份樣品中分離到沙門(mén)氏菌(7.1%),3份樣品中分離到E.coliO157:H7(0.6%)。對(duì)于沙門(mén)氏菌,7個(gè)取
3、樣點(diǎn)的陽(yáng)性檢出率分別為20.0%,17.1%,1.4%,2.9%,2.9%,2.5%和3.8%。E.coliO157:H7僅在糞便、皮毛、排酸后樣品中檢出,檢出率分別為1.4%,1.4%,1.3%。屠宰過(guò)程的不同工序中,去皮后樣品沙門(mén)氏菌檢出率顯著降低,其他工序沙門(mén)氏菌的檢出率沒(méi)有顯著差異。不同地域沙門(mén)氏菌流行率存在差異,工廠A的沙門(mén)檢出率(15.6%)顯著高于其它工廠的檢出率(P<0.05)。
采用PCR法對(duì)E.coli
4、O157:H7分離菌株進(jìn)行毒力基因檢測(cè),7株分離菌株都檢測(cè)到stx2、eae、rfbEO157、flicH7、hlyA基因的存在。應(yīng)用PCR對(duì)80株沙門(mén)氏菌invA基因進(jìn)行檢測(cè),所有菌株都擴(kuò)增得到了284bp的目的條帶。隨機(jī)抽取部分沙門(mén)氏菌分離菌株進(jìn)行血清分型研究,結(jié)果顯示,18株沙門(mén)氏菌的血清型分別為火雞沙門(mén)氏菌(S.meleagridis,44.4%)、德?tīng)柋吧抽T(mén)氏菌(S.derby,44.4%)、科特布斯沙門(mén)氏菌(S.kottbu
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