表面修飾型載乳糖酶聚合物納米粒的制備及克服乳糖不耐癥的研究.pdf

1、乳糖是牛奶中的主要碳水化合物，并且還廣泛的存在于乳制品和加工食品以及藥品中。β-半乳糖苷酶（乳糖酶）位于小腸黏膜的刷狀緣，能將乳糖水解成葡萄糖和半乳糖。然而，70％以上的世界人口，在斷奶之后會漸漸地失去合成乳糖酶和水解乳糖的能力從而導(dǎo)致乳糖不耐癥。缺乏乳糖酶，乳糖不能在小腸消化吸收，從而到達結(jié)腸，在那里它通過結(jié)腸細菌發(fā)酵并增加了滲透壓，這可能導(dǎo)致腹部疼痛，腸鳴腹脹，腹瀉，甚至頭痛和注意力分散等臨床癥狀。目前治療乳糖不耐癥的方法主要是補充

2、外源性乳糖酶?？诜晌⑸锂a(chǎn)生的乳糖酶制劑，如膠囊和片劑，已證明可以成功地減少胃腸道不適的癥狀但是會產(chǎn)生依賴性。然而，由于小腸中的酶促降解和較短的存留時間，目前為止最有效的方法是在攝入乳糖之前或與之一起服下乳糖酶制劑。因此，尋找一個長效且能保護乳糖酶和進行黏膜靶向的制劑是十分必要的。由生物相容性、可生物降解的、FDA批準可以使用的PLA或PLGA為殼材的聚合物納米粒，是多孔，半滲透，允許小分子透過的，但蛋白質(zhì)或酶不能透過?？梢韵胂螅樘?/p>

3、酶被包埋在PLA或PLGA的納米?？墒谷樘峭高^，但蛋白或酶被截留在外面從而防止酶促降解。納米粒靶向定位到黏膜上廣泛使用方法是利用表面吸附或偶聯(lián)基團可以特異性結(jié)合于腸黏膜上。
　　1、將小麥胚芽凝集素（WGA）與水溶性殼聚糖（WSC）共價結(jié)合，通過物理吸附協(xié)同修飾聚乳酸納米粒，使β-半乳糖苷酶靶向定位到腸黏膜。采用復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備的經(jīng)過表面修飾的載乳糖酶聚乳酸納米粒的粒徑范圍在500~600 nm之間。
　　2、β-半乳糖苷

4、酶包埋在納米粒中不僅阻止了外部的蛋白水解作用而且可以使乳糖滲透到納米粒中從而提高乳糖水解率。無論納米粒的表面有無WGA，WSC的存在都大大提高了納米粒的懸浮穩(wěn)定性并且會使納米粒表面帶正電荷。
　　3、通過體外實驗證明，表面用WGA和WSC與單獨用WSC修飾的納米粒相比較而言，WGA和WSC的協(xié)同修飾極大地增強了納米粒與黏蛋白的相互靶向作用。
　　4、大鼠經(jīng)口服給藥24 h后，在小腸中發(fā)現(xiàn)的納米粒數(shù)量最多。通過計算得出，WGA

5、-WSC-NPs在小腸中的半衰期為6.72 h，分別是WGA-PVA-NPs、WSC-NPs和對照組PVA-NPs的2.1、4.3和6.9倍。這些結(jié)果表明，WGA-WSC協(xié)同修飾的納米?？梢酝ㄟ^黏膜靶向給藥用于治療乳糖不耐癥。
　　腸溶包衣膠囊是一種有效的為特定腸道口服給藥技術(shù)，這是基于pH釋放敏感聚合物，包括羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯（HPMCP，HP55），聚甲基丙烯酸等等?；谶@些方面，本文的研究思路是建立一個口服給藥系統(tǒng)

6、-載有乳糖酶聚乳酸的納米粒腸溶包衣膠囊?；靖拍钍?，腸溶包衣膠囊在胃的高酸性環(huán)境中保持不變，但在中性或微堿性的環(huán)境小腸中溶解迅速，釋放出載乳糖酶聚乳酸納米粒。
　　1、為了防止口服乳糖酶在胃腸道環(huán)境中的降解和充分的分解乳中的乳糖，本實驗研制了載乳糖酶聚乳酸納米粒，并用腸溶衣膠囊封裝的雙重膠囊遞送系統(tǒng)。采用改進的復(fù)乳法制備的載乳糖酶納米粒的大小在100~200 nm之間。
　　2、在制備過程中，采用高壓均質(zhì)，二氯甲烷、乙酸乙酯

7、作為油相，聚乙烯醇或泊洛沙姆188作為內(nèi)水相穩(wěn)定劑能有效提高乳糖酶的保留活力。隨后，制備好的納米粒采用冷凍干燥法凍干，用羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯膠囊封裝。
　　3、經(jīng)過體外實驗表明：在模擬胃液環(huán)境中羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯膠囊能保持完整性，并可以防止包埋的乳糖酶在酸性環(huán)境中變性。在模擬腸液環(huán)境中，膠囊迅速分解并釋放出載乳糖酶聚乳酸納米粒，與普通的乳糖酶相比，顯示出了更高的酶穩(wěn)定性及水解乳糖率。這些結(jié)果表明本實驗研究的載乳糖