自然發(fā)酵酸馬奶中酵母菌的分離鑒定及酵母菌產(chǎn)乳糖酶的研究.pdf

1、本研究主要是從新疆南山水西溝牧民家庭的酸馬奶中分離出25株酵母菌,并對(duì)25株酵母菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)特征觀察,生理生化,糖發(fā)酵試驗(yàn)及5.8S rDNA分子生物學(xué)鑒定酵母菌得出:Kazachstania unispora10株、Kluyveromyces marxianus7株、Kluyveromyces lactis4株、Saccharomyces cerevisiae1株、Galactomyces geotrichum1株、菌株27疑似新種。

2、鑒定結(jié)果對(duì)我們進(jìn)一步認(rèn)識(shí)并利用傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品中酵母菌資源具有重要意義。
　　通過含X-gal的篩選板在6株酵母菌篩選出了2株產(chǎn)β-半乳糖苷酶的2種菌株:K.lactis與K.marxianus,分別命名為K.lactis-ZJ14,K.marxianus-ZJ19。經(jīng)過復(fù)篩后K.lactis-ZJ14表現(xiàn)出良好的產(chǎn)乳糖酶性能。為提高K.lactis-ZJ14產(chǎn)酶性能,對(duì)K.lactis-ZJ14產(chǎn)酶條件進(jìn)行單因素優(yōu)化試驗(yàn),結(jié)果顯示

3、培養(yǎng)條件為:溫度30℃、pH7.0、接種量4％、培養(yǎng)時(shí)間18h。為了進(jìn)一步提高菌株K.lactis-ZJ14產(chǎn)酶性能,對(duì)K.lactis-ZJ14產(chǎn)酶培養(yǎng)基優(yōu)化,通過采用單因素試驗(yàn)、PB試驗(yàn)、Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)得出:K.lactis-ZJ14最佳液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基組分為乳糖15.74g/L、酵母膏10.31g/L、硫酸鎂4.84g/L、磷酸二氫鉀5.42g/L。此最佳培養(yǎng)條件下最大酶活性為56.76U/mL。
　　為能更好

4、的利用和保存該乳糖酶,對(duì)K.lactis-ZJ14粗酶液性質(zhì)進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:該乳糖酶具有較高的低溫穩(wěn)定性,粗酶液在4℃條件下保存30d后,酶活力是原酶活性的80%以上;該乳糖酶在35~45℃范圍內(nèi)活力較高,最適反應(yīng)溫度35℃;此酶在溫度在20~55℃下具有耐受性,酶在20~45℃范圍內(nèi)處理2h后,殘留酶活均在90%以上,在55℃下處理2h其殘留酶活為71%;該粗酶液在pH6.0~8.0范圍內(nèi)活力較高,其最適反應(yīng)pH7.0,在pH6