濟(jì)南市售降糖保健品質(zhì)量調(diào)查及西藥成分檢測.pdf

1、目的：
　　隨著老齡化社會的到來，糖尿病患者數(shù)量逐漸增多，人們對自身健康狀況關(guān)注度不斷增加。近年來人們生活水平的提高，促進(jìn)了保健品市場的繁榮，但是對于市售保健品的功效和安全性的負(fù)面報道層出不窮。因此對降糖保健品開展質(zhì)量監(jiān)測工作，在保障糖尿病患者的合法權(quán)益、提高患者生活質(zhì)量方面有重要意義。目前缺乏對市售降糖保健品進(jìn)行全面的市場調(diào)查的數(shù)據(jù)，也很少有針對濟(jì)南市售降糖保健品的質(zhì)量及是否添加西藥成分的檢測的報道。本研究擬在建立一種高效、靈敏

2、、快速的高效液相色譜-二極管陣列檢測法(HPLC-DAD)，同時檢測樣品中降糖西藥二甲雙胍、格列本脲、格列吡嗪及格列美脲，通過在濟(jì)南市區(qū)各大藥店、超市及保健品市場進(jìn)行隨機(jī)抽樣采集降糖保健品，對其產(chǎn)品質(zhì)量及非法添加的降糖西藥進(jìn)行檢測，并對樣品進(jìn)行功效成分，污染物限量指標(biāo)鉛(Pb)、砷(As)、汞(Hg)，微生物指標(biāo)菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌與酵母菌的檢測，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)對降糖保健食品進(jìn)行質(zhì)量評價，對不合格原因進(jìn)行分析，為國家監(jiān)管與人們對保健品

3、的消費(fèi)提供依據(jù)。
　　方法：
　　1.樣品采集
　　1.1.采集方法
　　在對濟(jì)南保健品市場考察的基礎(chǔ)上，確定采樣地點后，采用完全隨機(jī)抽樣方法，從各大超市、藥店、保健品市場采集降糖保健食品。
　　1.2.樣品數(shù)量
　　共采集17種27批降糖保健品，在超市及連鎖藥店采集8種15批次，在保健品市場采集9種12批次。采樣結(jié)束后，對樣品進(jìn)行編號，分類整理。
　　2.西藥成分添加的檢測
　　2.1.

4、樣品前處理
　　膠囊類樣品，取膠囊內(nèi)容物混勻;粉末狀樣品，直接混勻;片劑、袋泡茶、餅干或者麥片，先用研缽研碎混勻;待測樣品都細(xì)碎混勻后，再精密稱取一定質(zhì)量，置容量瓶中，用甲醇超聲提取后，定容至刻度。
　　膠囊殼溶液的制備，任取膠囊顆粒若干，傾出膠囊內(nèi)容物，用棉花擦拭干凈膠囊殼，剪成碎片，精密稱取剪碎的膠囊殼，置于容量瓶中，加入50％甲醇水，60℃水浴充分溶解后，冷卻至室溫，用50％甲醇水定容，活性炭振搖，除去色素，過濾。

5、r>　　2.2.色譜條件
　　色譜柱:C18（250 mm×4.6 mm，4.6μm，大連依利特）;流動相A為甲醇，流動相B為0.02 mol/L的磷酸二氫銨（十二烷基硫酸鈉0.06％，三乙胺與磷酸調(diào)pH至3.0+0.05）;流速:1.0 mL/min;柱溫:25℃;進(jìn)樣量:20μL;檢測波長:230 nm。梯度洗脫程序:0～6 min，A∶B=60∶40(V∶V);6～8min，A∶B=60～70∶40～30(V∶V);8～16

6、 min, A∶B=70∶30(V∶V);16～18min, A∶B=70～60∶30～40(V∶V);18～25 min, A∶B=60∶40(V∶V)
　　3.功效成分的檢測
　　3.1.檢測項目
　　從樣品包裝上確定待檢測的功效成分有以下11種，總皂甙、總黃酮、總多糖、粗多糖、葛根素、膳食纖維、苦瓜甙、吡啶甲酸鉻、三價鉻(Cr3+)、鉻(Cr)、鋅(Zn)。其中只含有一種功效成分的樣品有9種、12批次，含有兩種以

7、上功效成分的樣品有8種、15批次。將功效成分分為以下幾組進(jìn)行檢測:總皂甙，總黃酮，總多糖和粗多糖，葛根素，膳食纖維，苦瓜甙，吡啶甲酸鉻，Cr3+，Cr、Zn。
　　3.2.檢測方法
　　3.2.1.總皂甙
　　依據(jù)檢測標(biāo)準(zhǔn)，衛(wèi)生部《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范(2003版)》保健食品中總皂甙的測定，樣品處理后，用紫外-可見分光光度法進(jìn)行檢測。
　　3.2.2.總黃酮
　　依據(jù)檢測標(biāo)準(zhǔn)，衛(wèi)生部《保健食品檢驗與評

8、價技術(shù)規(guī)范(2003版)》保健食品中總黃酮的測定，樣品處理后，用紫外-可見分光光度法進(jìn)行檢測
　　3.2.3.總多糖和粗多糖
　　依據(jù)《保健食品功效成分檢測方法（白鴻主編）》粗多糖的苯酚硫酸分光光度測定法檢測粗多糖，
　　3.2.4.葛根素
　　依據(jù)檢測標(biāo)準(zhǔn)GB/T22251-2008《保健食品中葛根素的測定》，樣品處理后，采用HPLC法進(jìn)行檢測。
　　4.污物限量指標(biāo)Pb、As、Hg的測定
　　分別

9、依據(jù)GB500912-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定》、GB/T5009.11-2003《食品中總砷及無機(jī)砷的測定》、GB/T5009.17-2003《食品中總汞及有機(jī)汞的測定》，樣品用微波消解法處理，定容后，用石墨爐原子吸收法測定Pb，用原子熒光法測定As、Hg
　　5.微生物指標(biāo)的測定
　　分別按照國標(biāo)方法GB47892-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定》、GB4789.3-2010《食品

10、安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)》、GB478915-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數(shù)》進(jìn)行菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌和酵母菌的測定。
　　結(jié)果：
　　1.總體檢測情況
　　本次調(diào)查檢測四大類項目，某批次保健品在任何一項檢測的結(jié)果不合格即認(rèn)為該產(chǎn)品不合格。本次采集的27批樣品中，共有23批樣品不合格，不合格率為85％。
　　2.降糖保健品中可能添加的西藥成分檢測結(jié)果
　　2.1

11、.降糖保健食品中西藥成分添加的方法學(xué)研究
　　在給定條件下，二甲雙胍、格列吡嗪、格列本脲及格列美脲得到了較好的分離，峰形良好。保留時間依次是二甲雙胍(4.98min)、格列吡嗪(8.00 min)、格列本脲(15.40 min)、格列美脲(18.04 min)。四種降糖西藥在4～80 mg/L的濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r均在0.999以上。二甲雙胍:y=29931.84x-37758.17(r=0.9995)，加標(biāo)回收率

12、在96.12％～102.7％范圍內(nèi)，日內(nèi)精密度RSD日內(nèi)在2.08％～4.24％范圍內(nèi)，日間精密度RSD日間在3.26％～5.66％范圍內(nèi)，檢出限是0.025 mg/L;格列吡嗪:y=18359.70x-26693.43(r=0.9994)，加標(biāo)回收率在97.09％～101.8％范圍內(nèi)，日內(nèi)精密度RSD日內(nèi)在2.28％～4.27％范圍內(nèi)，日間精密度RSD日間在4.08％～5.21％范圍內(nèi)，檢出限是0.044 mg/L。格列本脲:y=19

13、189.23x+6878.51(r=0.9993)，加標(biāo)回收率97.86％～101.4％范圍內(nèi)，日內(nèi)精密度RSD日內(nèi)在2.27％～4.62％范圍內(nèi)，日間精密度RSD日間在3.29％～5.10％范圍內(nèi)，檢出限是0.039 mg/L。格列美脲:y=17946.35x-9422.86(r=0.9993)，加標(biāo)回收率在97.23％～101.6％范圍內(nèi)，日內(nèi)精密度RSD日內(nèi)在2.43％～4.77％范圍內(nèi)，日間精密度RSD日間在3.08％～5.21

14、％范圍內(nèi)，檢出限是0.035 mg/L。
　　2.2.降糖保健品中可能添加的西藥成分及含量測定結(jié)果
　　27批樣品中，陽性樣品的檢出率為22.2％，有6批樣品可能添加了降糖西藥，其中有2批樣品的膠囊殼內(nèi)可能添加二甲雙胍，未有樣品添加格列美脲。二甲雙胍的檢出率為7.4％，陽性樣品含量分別為7.01 mg/g、1.69 mg/g，每人每日攝入量分別是7.37 mg/d、1.01 mg/d;格列吡嗪的檢出率為7.4％，陽性樣品含量

15、分別為0.46 mg/g、0.47 mg/g，每人每日攝入量分別是0.83 mg/d、6.41 mg/d;格列本脲的檢出率為7.4％，陽性樣品含量分別為13.73 mg/g、2.13 mg/g，每人每日攝入量分別是15.44 mg/d、4.27 mg/d。
　　3.降糖保健品中功效成分含量測定結(jié)果
　　27批樣品中，功效成分不合格樣品的檢出率為63.0％，功效成分不合格樣品的檢測值占企標(biāo)最低有效劑量的比例在14.5％～96％

16、范圍內(nèi)。
　　4.降糖保健品中重金屬污染限量指標(biāo)測定結(jié)果
　　27批樣品中，按照GB16740-1997進(jìn)行評價，重金屬含量超標(biāo)率為22.2％，其中Pb超標(biāo)率為18.5％，As超標(biāo)率為3.7％，Hg超標(biāo)率為3.7％;按照GB16740-2014進(jìn)行評價，重金屬含量超標(biāo)率為11.1％，其中Pb超標(biāo)率為7.4％，As超標(biāo)率為3.7％，Hg超標(biāo)率為3.7％。
　　Pb的每天攝入量占每人每天耐受攝入量(PTDI)的比例在0.0

17、1％～64.5％范圍內(nèi)，As的每天攝入量占每人每天最高允許攝入量(PTDI)的比例在0.00004％～0.675％范圍內(nèi)，Hg的每天攝入量占每人每天耐受攝入量(PTDI)的比例在0.01％～5.03％范圍內(nèi)。
　　結(jié)論：
　　1.濟(jì)南市售降糖保健品質(zhì)量較差，合格率較低。
　　2.建立的同時檢測二甲雙胍、格列吡嗪、格列本脲、格列美脲的HPLC-DAD法，高效、靈敏、快速，適合批量檢測。
　　3.濟(jì)南市售降糖保健品的