白酒發(fā)酵過(guò)程中原核微生物群落分析.pdf

1、本論文以濃香型白酒酒醅、大曲和窖泥中的原核微生物為研究對(duì)象，采用PCR-SSCP方法初步分析了白酒發(fā)酵過(guò)程中原核微生物群落的變化情況。本文的主要研究結(jié)果如下:
　　1、PCR-SSCP操作方法和參數(shù)的優(yōu)化。首先，優(yōu)化并確定了適合酒醅、大曲、窖泥的總基因組DNA提取方法;其次，比較并確定一種染色時(shí)間短且效果好的銀染方法;最后，優(yōu)化并確定了SSCP的操作參數(shù)。研究結(jié)果表明:變性緩沖液與樣品體積比為2∶1，凝膠濃度為14％，丙烯酰胺與雙

2、丙烯酰胺質(zhì)量比為49∶1，恒壓300V，4℃電泳18h。
　　2、酒醅原核微生物群落分析。酒醅樣品SSCP圖譜條帶數(shù)介于11-19條，不同發(fā)酵時(shí)間的原核微生物群落組成也不同，Shannon-Wiener多樣性指數(shù)介于2.40-2.94之間，Sorenson相似性指數(shù)介于0.73-1.00之間。對(duì)圖譜中3個(gè)條帶進(jìn)行回收并測(cè)序，顯示樣品中包含魏斯氏菌，乳酸菌和醋酸桿菌。
　　3、大曲原核微生物群落分析。大曲樣品SSCP圖譜條帶數(shù)

3、介于10-18條，不同發(fā)酵時(shí)間的原核微生物群落組成也不同，Shannon-Wiener多樣性指數(shù)介于2.56-2.89之間，Sorenson相似性指數(shù)介于0.80-1.00之間。對(duì)圖譜中5個(gè)條帶進(jìn)行回收并測(cè)序，顯示樣品中包含魏斯氏菌，乳酸菌，芽孢桿菌以及不可培的細(xì)菌菌屬。
　　4、窖泥原核微生物群落分析。窖泥樣品SSCP圖譜條帶數(shù)介于7-16條，Shannon-Wiener多樣性指數(shù)介于1.95-2.83之間。同一發(fā)酵時(shí)間不同窖池