硅藻土酶制劑規(guī)?；a(chǎn)及應(yīng)用.pdf

1、硅藻土是一種比表面積大，廉價，化學性質(zhì)穩(wěn)定，且分布廣泛的的天然無機礦物，在食品和化工行業(yè)具有廣泛的應(yīng)用。本文以硅藻土和Candida sp.99-125脂肪酶為原料，開發(fā)了一種以硅藻土為載體，將固定化與干燥過程耦合，規(guī)?；苽涔柙逋凉潭ɑ久钢苿┑男滦凸に?。
　　首先，本文對硅藻土固定化酶的小試工藝制備進行了探索，比較了不同無機載體的反應(yīng)效果，發(fā)現(xiàn)以硅藻土為載體的固定化酶，比其他的無機載體的固定化酶平均轉(zhuǎn)化率高出40％，為酶粉轉(zhuǎn)

2、化率的7倍。通過十四酸十四酯的合成體系和維生素A棕櫚酸酯合成的的體系，篩選不同型號的硅藻土載體，經(jīng)過比較選用吉林pH7.0的硅藻土作為規(guī)模化制備固定化酶的原料。
　　然后，對規(guī)?；苽涔に嚨奶砑觿┻M行了選擇。先驗證了添加劑的效果，發(fā)現(xiàn)加了添加劑的固定化酶催化效率比沒有加添加劑的固定化酶，催化效率提高了1.5倍。另外，經(jīng)過幾種疏水劑與添加方式的選擇，發(fā)現(xiàn)使用APTES（3-氨丙基三乙氧基硅烷）水相添加的疏水劑比其他疏水改造方式在轉(zhuǎn)化

3、率上高出5％，重復使用次數(shù)上多2批。APTES的加入量為酶量的2％(w/w)。由于在噴霧造粒中會通入熱空氣，為了增加酶的熱穩(wěn)定性，加入了TG酶（谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶）。通過實驗數(shù)據(jù)可以看出，經(jīng)過TG酶交聯(lián)的酶液，在60℃的穩(wěn)定性大大提高，相比沒有交聯(lián)的酶液，其在70min內(nèi)酶活沒有下降。
　　還有，在規(guī)?；苽涞墓に囍袃?yōu)化了攪拌方式，采用勻漿機的攪拌方式，效率比攪拌罐攪拌提高了30％。在由酶粉規(guī)?；苽涔柙逋凉潭ɑ钢苿┑墓に囍?，優(yōu)化了

4、操作參數(shù)，選用80℃，15mL/min，并且成功制備了酶與土比例(w/w)為:1∶17，1∶14，1∶8，1∶4的硅藻土固定化酶制劑，經(jīng)過酶活測定，發(fā)現(xiàn)比起小試工藝水解酶活有30％的增幅，酯化酶活有5％的增加。對以上工藝制備出的固定化酶制劑進行保質(zhì)期測試，發(fā)現(xiàn)水活度保持在0.376時，4℃下保存6個月內(nèi)酯化酶活沒有下降。
　　另外，還開發(fā)了發(fā)酵液離心后直接制備硅藻土固定化酶制劑的工藝，用上清液直接制備固定化酶制劑，制備酶與土比例(

5、w/w)為0.75∶1，1∶4，1∶14的硅藻土固定化酶制劑，水解酶活都可以達到酶粉工藝，但是酯化酶活較低，可能是除水干燥工藝還需改進。
　　最后，在酶法合成酯的應(yīng)用上做了驗證試驗，對于高比例的硅藻土固定化酶，將其用于30L生物酶法合成生物基增塑劑的反應(yīng)中，發(fā)現(xiàn)可以連續(xù)使用6批，平均轉(zhuǎn)化率達到85％。中比例硅藻土固定化酶，可用在5L生物酶法合成VA酯的反應(yīng)中，使得其可以連續(xù)使用8批，轉(zhuǎn)化率達到85％。此外，還接著開發(fā)了VA中鏈脂肪