基于聚集誘導(dǎo)發(fā)光效應(yīng)多肽類熒光探針的合成及其在癌癥診療中應(yīng)用.pdf

1、癌癥的早期診斷和及時(shí)治療對(duì)于癌癥的治愈起著至關(guān)重要的作用。到目前為止，雖然越來越多的科技手段已經(jīng)應(yīng)用于癌癥的診斷和治療，但是徹底治愈癌癥仍然是一項(xiàng)巨大的挑戰(zhàn)。將癌癥的診斷與治療相結(jié)合，不僅有利于癌癥的精確治療與徹底治愈，而且更有利于系統(tǒng)、全面、深入了解癌癥發(fā)生和發(fā)展的本質(zhì)。因此，如果能夠建立一個(gè)多重功能結(jié)合的智能診療結(jié)合系統(tǒng)，將會(huì)給癌癥研究指明新的方向，為治愈癌癥提供新的契機(jī)。本論文將具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光效應(yīng)（Aggregation-ind

2、uced emission，AIE）的多肽類熒光探針融于診療結(jié)合系統(tǒng)中，通過對(duì)多肽類AIE熒光探針的合理設(shè)計(jì)和高效合成等方面的研究，探索它們?cè)谧粉櫵幬镝尫?、長(zhǎng)時(shí)間細(xì)胞成像和診療結(jié)合等方面的應(yīng)用，為臨床疾病的診療結(jié)合提供新方法和新思路。本論文的主要內(nèi)容包括以下四個(gè)方面：
　?。?）分別利用“巰基-馬來酰亞胺”點(diǎn)擊反應(yīng)和“疊氮-炔基”點(diǎn)擊反應(yīng)，將功能性穿膜肽FCPPs（CRRRRRRRRRPLGLAGPra-NH2）與抗癌藥物阿霉素D

3、OX和AIE熒光分子PyTPE進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)，成功得到了一種可以高效穿透細(xì)胞膜和對(duì)癌細(xì)胞中高表達(dá)的基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）響應(yīng)的熒光探針DFP。DFP可被MMP-2特異性切斷，當(dāng)沒被MMP-2切斷時(shí)，DFP不容易進(jìn)入細(xì)胞中；當(dāng)DFP被MMP-2特異性切斷后，熒光探針從DFP上分離，聚集后產(chǎn)生黃色熒光信號(hào)，DOX被穿膜肽快速運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞內(nèi)。這樣既能實(shí)現(xiàn)藥物的可控運(yùn)輸，又可以對(duì)藥物釋放進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控。在MMP-2高表達(dá)的細(xì)胞系中，DFP運(yùn)

4、輸DOX的速度比DOX單純擴(kuò)散速度更快，殺死癌細(xì)胞的能力更強(qiáng)，并且還可用于區(qū)分不同細(xì)胞系。因此，DFP成功實(shí)現(xiàn)了腫瘤微環(huán)境響應(yīng)的藥物可控運(yùn)輸和成像，能有針對(duì)性增強(qiáng)治療效果，有助于我們更直觀的研究抗癌藥物的治療過程。
　?。?）利用“疊氮-炔基”點(diǎn)擊反應(yīng)，將能靶向整合素蛋白αvβ3的多功能組合肽TNC（DGRKRRRRRRRRPra-NH2）與AIE熒光分子PyTPE進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)，成功得到熒光探針TNCP。TNCP不僅能對(duì)高表達(dá)整合

5、素αvβ3的細(xì)胞系進(jìn)行特異性識(shí)別，還能以較快的速度進(jìn)入靶細(xì)胞中，具有良好的AIE熒光成像效果。TNCP可以利用靜電吸附作用和親疏水自組裝作用將siRNA高效封裝起來，靶向運(yùn)輸?shù)侥[瘤部位進(jìn)行基因治療。通過AIE探針對(duì)基因運(yùn)輸過程進(jìn)行實(shí)時(shí)追蹤，為進(jìn)一步揭示基因治療在診療結(jié)合中的奧秘提供新的方法和策略。
　　（3）利用“疊氮-炔基”點(diǎn)擊反應(yīng)，將能同時(shí)靶向整合素蛋白αvβ3和氨基肽酶N（CD13）的多功能組合肽TCNT（CNGRCRRRR

6、GPraGRRRRKRGD-NH2）與AIE熒光分子PyTPE進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)，成功得到熒光探針TCNTP。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，TCNTP能同時(shí)對(duì)整合素αvβ3和CD13響應(yīng)，并具有細(xì)胞選擇性核定位性質(zhì)，有很強(qiáng)光穩(wěn)定性和低毒性，可用于長(zhǎng)時(shí)間細(xì)胞成像。另外，TCNTP也可以作為一種新型抗癌藥物的運(yùn)載體，使抗癌藥物在診療結(jié)合中的高效運(yùn)輸成為可能。
　?。?）利用“疊氮-炔基”點(diǎn)擊反應(yīng)，將酪氨酸（Tyr）衍生物與AIE熒光分子TPE-2N3進(jìn)行