養(yǎng)陰益氣活血法調(diào)控MAPK信號(hào)通路阻斷糖尿病大血管病變GK大鼠“代謝記憶”的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本研究從氧化應(yīng)激為入口，觀察不同時(shí)間窗下具有養(yǎng)陰益氣、活血化瘀功效的參芪復(fù)方對(duì)糖尿病大血管病變GK大鼠血糖、血清CHOL、8-iso-PGF2α；胸主動(dòng)脈勻漿SOD、MDA；胸主動(dòng)脈病理形態(tài)、細(xì)胞凋亡的影響，進(jìn)行量-時(shí)-效關(guān)系分析，推測(cè)其可能通過(guò)抑制氧化應(yīng)激、阻斷“代謝記憶”途徑來(lái)保護(hù)大血管。并應(yīng)用基因芯片技術(shù)尋找參芪復(fù)方防治糖尿病大血管病變的分子靶點(diǎn)，探討?zhàn)B陰益氣活血法阻斷“代謝記憶”的生物學(xué)作用及其機(jī)理，為臨床推廣中醫(yī)藥防治糖

2、尿病大血管病變提供理論依據(jù)。
　　方法：160只GK大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，依據(jù)隨機(jī)血糖水平由高到低排列編號(hào)，隨機(jī)分為模型組、參芪復(fù)方高劑量組(參高組)、參芪復(fù)方中劑量組(參中組)、參芪復(fù)方低劑量組(參低組)、二甲雙胍組(西藥組)，每組32只，給予高脂飼料飼養(yǎng)；Wistar組(空白組)32只給予普通飼料飼養(yǎng)；連續(xù)喂養(yǎng)12周，建立糖尿病“代謝記憶”模型。造模完成后，模型組和空白組給予5ml/kg.d生理鹽水灌服，參高組給予2.88g/

3、kg.d參芪復(fù)方浸膏灌服，參中組給予1.44g/kg.d參芪復(fù)方浸膏灌服，參低組給予0.72g/kg.d參芪復(fù)方浸膏灌服，西藥組給予0.1g/kg.d二甲雙胍灌服，治療干預(yù)16周。實(shí)驗(yàn)期間從整體水平觀察各組大鼠的一般情況，監(jiān)測(cè)空腹血糖變化；各組大鼠分別在灌胃后第8、16周末處死，檢測(cè)血清CHOL、胸主動(dòng)脈勻漿SOD、MDA等指標(biāo)；從組織水平，檢測(cè)胸主動(dòng)脈細(xì)胞凋亡情況，HE染色對(duì)胸主動(dòng)脈進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察；觀察不同時(shí)間窗下，不同干預(yù)方式對(duì)模型

4、大鼠“代謝記憶”的影響效果。借助基因芯片技術(shù)對(duì)胸主動(dòng)脈組織進(jìn)行基因表達(dá)譜檢測(cè)，篩選出差異表達(dá)基因，進(jìn)行GO注釋?zhuān)琍athway分析，解釋生物學(xué)意義。
　　結(jié)果：參中組的作用優(yōu)于參高組和參低組，能夠明顯改善GK大鼠的一般狀況、血糖、血脂、氧化應(yīng)激指標(biāo)、胸主動(dòng)脈病理形態(tài)及細(xì)胞凋亡。參中組與模型組差異表達(dá)基因，經(jīng)GO注釋、Pathway分析，主要涉及大分子代謝過(guò)程、細(xì)胞死亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞遷移和MAPK信號(hào)通路、刺猬信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、Not

5、ch信號(hào)通路、胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等通路；涉及到Csnk1d、Lama4、Elavl1、Abi1、Anxa1、Nsg1等基因。
　　結(jié)論：參中組可以更好地改善糖尿病大血管病變GK大鼠的一般狀態(tài)，降低血糖，改善脂代謝紊亂，減輕氧化應(yīng)激，保護(hù)大鼠血管內(nèi)皮損傷，阻斷“代謝記憶”。其作用機(jī)理可能是通過(guò)調(diào)控大分子代謝過(guò)程、細(xì)胞死亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞遷移和MAPK信號(hào)通路、刺猬信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、Notch信號(hào)通路、胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等通路及Csnk1d、La